Aller au contenu


***** Bienvenue dans le forum MikrOscOpia ! *****
Photo
- - - - -

coupes végétales : 2. pourquoi faire lavage et coloration ?


  • Veuillez vous connecter pour répondre
2 réponses à ce sujet

#1 pablito

pablito

    Homo sapiens microscopicus

  • Co.Admin
  • 1 242 messages

Posté 24 mai 2014 - 09:07

Bonsoir, on va expliquer, très simplement, les techniques de colorations qu'on utilise (dans le post 3),
mais avant cela, on veut montrer ce qu'il se passe si on ne fait aucune préparation sur une coupe réalisée au chapitre 1

L'objet de ce post est simplement didactique, on a travaillé et on présente des résultats ... de ce qu'il ne faut pas faire !!!
Mais la question se pose, car les techniques de colorations demandent beaucoup de travail ... cela vaut-il la peine ???
Mais avec Pablo, on teste tout, puisqu'on ne connait rien.

1. Ne rien faire et regarder

Après tout, on fait une coupe très très fine, on la met sous le microscope directement
sur une tige d'asperge, avec renforcement du contraste, voilà le résultat qui est très décevant : comme on n'a pas nettoyé à l'eau de javel, il reste plein de saletés dans les cellules,
comme on n'a pas coloré, on ne comprend pas grand chose aux tissus et à leur rôle. (Note complémentaire, coupe transversale d'asperge) :

2A9C2268_V9.jpg

2. Nettoyer les cellules à l'eau de javel, puis regarder sans coloration

Le nettoyage, c'est finalement une seule opération, 10-15 minutes, mais sans rien faire, un seul bain : cool ...
alors que la coloration (ou les colorations), c'est plus long et plus compliqué.
sauf que le résultat ... Bof Bof Bof : dans la photo précédente, ce qui gène le plus, c'est la différentiation impossible des tissus, pas les saletés dans les cellules !!!
voilà donc, puisque l'on a tout testé, le résultat d'un passage à l'eau de javel, puis observation (NB toujours asperge) :

2A9C2223_V91.jpg

3. colorer sans nettoyage à l'eau de javel

Le problème du nettoyage à l'eau de javel, c'est qu’après, il faut réguler le PH pour réussir la coloration.
on a donc essayé une coupe, en mettant directement les deux colorants mélangés (carmin aluné et vert d'iode) sans passage à l'eau de javel et protocole acide acétique qui suit.
Le résultat est pas si mal, et si on est pressé, c'est plus intelligent de colorer que de nettoyer à l'eau de javel. Mais, évidemment; il reste des saletés dans les cellules et ce n'est pas parfait !!!
Pour info, il s'agit ici d'une coupe express d'iris, présentée complète sur le forum par ailleurs)

2A9C2276_V9.jpg

4. Vider les cellules, puis faire une simple coloration

Oui, il faut vider les cellules à l'eau de javel, oui, il faut colorer, mais pourquoi deux fois ???
Bonne question, Gaston, on va donc présenter une coupe, vidée, puis colorée une seule fois
On a testé plein de colorants simples, le mieux est un passage en milieu alcool puis coloration au bleu de méthylène en zone alcool, car il est assez spécifique et ne fait pas dans le microscope une couleur dominante.
Il n’empêche .... C'est assez beau, mais il manque les informations sur la différentiation des tissus.
Et puis, ou est l'intérêt ? car une couleur ou deux couleurs, c'est une heure ou une heure et 5 minutes de travail ... Donc la même chose, finalement !!!
Mais pour la complétude de notre démonstration (on s'est bien amusés) voilà une photo avec une coloration unique (coupe d'asperge, coloration méthylène dans l'alcool):

2A9C2240_V9.jpg

5. Conclusion

et bien, il faut tout faire, pour obtenir une belle coupe : faire une double coloration après vidage des cellules
Donc notre troisième post.
Mais avant de clôturer, une dernière photo, réussie !!!!!! (coupe de rose trémière, avec lavage des cellules et double coloration)

Pierre et Pablo

2A9C2160_V9.jpg


Modifié par pablito, 24 mai 2014 - 09:15 .

  • 0

#2 vasselle

vasselle

    Invertébré

  • Visiteur *
  • PipPipPip
  • 332 messages

Posté 24 mai 2014 - 11:43

Bonjour 

Très bon sujet

Cordialement seb


  • 0

#3 Tryphon T

Tryphon T

    oooOooo

  • Membre confirmé
  • PipPipPipPipPipPipPipPipPipPip
  • 13 042 messages

Posté 25 mai 2014 - 08:15

Bonjours les Pablos,

 

Bravo pour votre démarche intellectuelle, même si elle à l'air terriblement empirique, je sens qu'il se cache derrière une méthode qui l'est beaucoup moins.

J'attends avec impatience vos conclusions.


  • 0




N'oubliez pas de consulter notre Magazine en ligne ... MIK-MAG!