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Rocking microtome de Cambridge

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16 réponses à ce sujet

#1 savant Cosinus

savant Cosinus

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 16 décembre 2016 - 05:08

Bonjour,

Dans le but de faire des coupes à la paraffine, j'ai hésité devant l'investissement d'un "vrai" microtome (rotatif) et je me suis tourné vers le microtome de Cambridge, très abordable.

Ce microtome dont le mouvement est à bascule date de la fin du 18° siècle... mais est encore fabriqué (en Inde) et se trouve chez Brunel U.K.  Les Anglais en disent grand bien... on va essayer.

Quelques images pour vous le montrer, sachant que le plus dur reste à faire... les inclusions et les coupes, ici on est au niveau du technicien de laboratoire, et si c'est réussi, il faudra passer au niveau de l'histologiste... c'est une autre histoire  :( !

 

 DSC00277 (640x427).jpg

DSC00278 (640x427).jpg

 

 


  • 0

#2 Tryphon T

Tryphon T

    oooOooo

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Posté 16 décembre 2016 - 05:30

verboten.JPG


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#3 savant Cosinus

savant Cosinus

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 16 décembre 2016 - 06:37

... ça y est, ça doit marcher, désolé.


  • 0

#4 DOMI8723

DOMI8723

    Nucléotide

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Posté 16 décembre 2016 - 07:11

Bonjour,

C'est quoi très abordable ?

Et pour ce qui est du solvant de la paraffine ?

Difficile de se procurer du toluène... Une adresse ?

Merci.

 


  • 0

#5 Buteo

Buteo

    Invertébré

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Posté 16 décembre 2016 - 07:23

Bravo Cosinus,

"Go west young man" disait-on au moment de la conquête des grands espaces américains ( mais ne va pas trop loin : l'Atlantique est vite arrivé pour toi !), esprit d'aventure qui t'honore . Comme tu te lances et que si je l'avais fait c'est le microtome vers lequel je me serais tourné je suis preneur de toutes tes impressions et sûr que je ne suis pas le seul.

 

à DOMI8723 :sur le site de Brunel U.K  : 230 livres donc 274 euros sans compter l'envoi.

 

Buteo


  • 0

#6 DOMI8723

DOMI8723

    Nucléotide

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Posté 16 décembre 2016 - 07:43

Merci, je l'ai trouvé effectivement mais c'est encore cher pour moi !


  • 0

#7 Jean-Luc Bethmont (Picroformol)

Jean-Luc Bethmont (Picroformol)

    Reptile

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Posté 16 décembre 2016 - 08:41

Bonjour,

 

 

         C' est aussi un vieux projet que j' avais mais je l' ai mis de coté en partie à cause de la difficulté de s' approvisionner en certains réactifs.

Cosinus fait nous part de ton expérience.

Pour le toluène ou le xylène il y aurait un substitut le Limonène qui a une odeur d ' agrume.

 

Cordialement,

JL


  • 0

#8 sciroccoblow

sciroccoblow

    Procaryote

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Posté 16 décembre 2016 - 09:11

Bon courage, quand je vois l'engin je m'imagine mal faire une coupe avec, mais c'est peut être parce que j'ai déjà coupé sur des microtomes conventionnels.

 

Pour les réactifs, tu peux toujours demander à un laboratoire de pathologie médicale :)


  • 0

#9 savant Cosinus

savant Cosinus

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 16 décembre 2016 - 10:02

Merci de l'intérêt que vous portez à ce microtome... c'est ce que je pensais... on ose pas B) ! une visite à Dominique. m'a convaincu. 

 En effet les microtomes rotatifs sont vraiment chers, 1000 euros chez les hindous et 4 ou 5000 en Europe avec des occasions rares, c'est du matériel de laboratoire professionnel, difficile pour nous.

 D'où l'intérêt ce "Rocking microtome", mais il a l'air tellement désuet qu'on hésite... les Anglais qui n'ont pas peur des vieilles choses ont bien raison.

 La construction est très correcte, et le fonctionnement d'une simplicité étonnante est très satisfaisant (bien que je ne sois pas spécialiste). Précision: 350 euros TVA et port compris.

 La paraffine est facile à trouver en sac de 5 kg... Dutscher (www.dutscher.com) vend en sac d'un kilo.

 Pour le Toluène il faut ( chez mon droguiste.com par exemple) justifier d'une "activité professionnel"...? Il faut "laisser une trace" qui leur permet de justifier éventuellement la vente, je pense... à vous de voir... non j'ai pas dis ça :rolleyes: ! Vous pouvez aussi faire du charme à votre pharmacienne ou bien soudoyez votre médecin... plus sérieusement en expliquant vos motivations vous devez pouvoir émouvoir un "ayant droit".

 Pour ma part, c'est le résultat de cette activité qui me parait le plus difficile... l'histologie ! .. je vous tiens au courant.

Amicalement

Cosinus


Modifié par savant Cosinus, 16 décembre 2016 - 10:09 .

  • 0

#10 pablito

pablito

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 16 décembre 2016 - 10:51

Je suis béat d'admiration
On dirait presque une machine à coudre, mais c'est si beau !!!
On attend tous tes exploits cosinus
Pierre
  • 0

#11 Dominique.

Dominique.

    Invertébré

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Posté 16 décembre 2016 - 11:41

   Bonsoir 

       Cosinus tu as  surement  raison  dans ton choix  .
       La difficulté  avec le microtome n'est pas trop le système de  coupe  que la lame coupante  - or il me semble possible de fixer un porte couteau pour lame à usage unique sur ton appareil .

       Depuis que j' utilise  des lames à usage unique  la réalisation des coupes   n' est plus source  d' angoisse comme avant  -

       Tous ensembles nous suivons ton expérience avec un grand plaisir

     

              Amicalement

                                      Dominique


  • 0

#12 savant Cosinus

savant Cosinus

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 17 décembre 2016 - 09:50

Merci, je réalise mon rêve de toujours, je vais devenir célèbre... -_- !

 

@ Pierre, effectivement le coté "Machine SINGER" a du entrer en ligne de compte... aux temps de l'informatique c'est trop rigolo !

@ Dominique.

Peux tu me rappeler les deux colorants utilisés pour ta tête d'abeille... et éventuellement le moyen de se les procurer ?

Amicalement

Cosinus


  • 0

#13 Tryphon T

Tryphon T

    oooOooo

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Posté 17 décembre 2016 - 12:04

Bonjour,

 

 


@ Pierre, effectivement le coté "Machine SINGER" a du entrer en ligne de compte... aux temps de l'informatique c'est trop rigolo !

Pas du tout, cela ne ressemble pas à un Singer... (Quoi-que !)

 

Singer2.jpg  Singer5.jpg

 

Cela m'a servi à ressortir des réserves, mon Singer qui était tout neuf et dont les chromes commencent à se piquer!

(C'est en fait un prétexte pour demander conseil : Si quelqu'un a un remède ?)

J'ai ressorti aussi mon Minot, tout aussi atteint , je vous le présenterais après nettoyage...

 

Amicalement.


  • 0

#14 Dominique.

Dominique.

    Invertébré

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Posté 17 décembre 2016 - 11:29

Bonsoir Cosinus

 

 

   La technique la plus utilisée est la coloration  Hématoxyline  (pour les  noyaux)  Eosine pour le cytoplasme

 

Déparaffinage

Réhydratation  quelques secondes

Bain dans Hématoxyline de Mayer  10 minutes

Bain dans  eau bicarbonatée PH 7,8 à 8   3 minutes

Rincer à l’eau courante

Alcool 60° passage

Eosine alcoolique  à 2%  3 minutes

Rincer à l’eau courante

Passage dans   2 bains d’eau acétique  1 %   

Déshydratation   et montage  avec Eukit

 

--Eosine alcoolique  chez le pharmacien

--Hématoxyline de Mayer    ou de  Erhlichs ( noyau bleu clair)  ou de Harris  ( noyau bleu sombre )

http://www.brunelmic...k/solvents.html  30 ml    3£

http://www.mm-france...ORANTS LIQUIDES   mais par 500ml    entre  30 et 60 euros ht

 

                   Amicalement

                                                      Dominique


Modifié par Dominique., 17 décembre 2016 - 11:36 .

  • 0

#15 scrophulaire

scrophulaire

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Posté 18 décembre 2016 - 08:36

Bonjour,
Il en existe plusieur type
Dichrome de Mann,He
Trichrome de Masson ,HES,Hollande.....

mais pour moi, le plus difficile est la déshydratation et la mise en paraffine environs 48h voir 72h.
deux essais et deux échecs .

Amicalement
  • 0

#16 Dominique.

Dominique.

    Invertébré

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  • 366 messages

Posté 18 décembre 2016 - 10:22

    Bonjour Scrophulaire

 

              La déshydratation se fait selon le protocole suivant

                       -  Ethanol 30   60    90   environ 12 heures / 24 heures par bain  mais cela dépend du volume de l' échantillon .

                       -  Butanol 100    3 bains différents  de 12 heures.

 

             3 passages de  2 heures  dans le Xylène .

 

             Mise   en inclusion  dans paraffine liquide 4  jours ( bain à 56 °c )

 

                   cela  doit te donner de bons résultats

 

                 Amicalement

                                 Dominique


  • 0

#17 savant Cosinus

savant Cosinus

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 18 décembre 2016 - 10:56

Merci ...


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