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Coloration bactériennes


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13 réponses à ce sujet

#1 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 08 janvier 2017 - 07:49

Bonjour j'ai besoin de conseils pour colorer mes bacteries , j'ai besoin de savoir s'il m'est possible d'utiliser certaines techniques de coloration en tant que particulier et sans risque , je m'apprête à commander mes colorants sur le site de Marcel Lecomte...

Pour la coloration de Vago : j'aurais besoin de vert de méthyle a 2% sur le site ils ont du vert de methyle acetique sans la concentration je peux l'utiliser quand meme ?

Pour la coloration de rhodes : pas de risque ?

Et enfin pour la coloration de koster me semble irréalisable vous me confirmez ? Merci =)

Existe t'il d'autre coloration spécifique hors de gram ?
  • 0

#2 Jean-Luc Bethmont (Picroformol)

Jean-Luc Bethmont (Picroformol)

    Reptile

  • Membre Modérateur
  • 690 messages

Posté 08 janvier 2017 - 08:53

Bonsoir Julien,

Pour débuter facilement dans la coloration des bactéries je te conseille le bleu de méthylène car on peut se le procurer facilement, il est sans danger en solution aqueuse (attention toutefois si tu utilises une solution phéniquée: le phénol est toxique).
Une fois que tu auras maîtrisé la confection d' un frottis et ce type de coloration simple tu pourras te lançer dans des colorations un peu plus élaborées (Gram, Zhiehl, Fontana Tribondeau et autres) .
Pour la coloration de Vago (que je connaissais pas) il est indiqué sol aqueuse de vert de methyl sur le site suivant:
http://www.bioltrop....ION_DE_VAGO.doc

Cordialement,
JL
  • 0

#3 Tryphon T

Tryphon T

    oooOooo

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Posté 08 janvier 2017 - 09:17

 

Cette coloration est utilisée pour les colorations de Treponema, Leptospira et Borrelia

 

 

Matériel :
Lames étalées, colorants.

Mode opératoire :
Réaliser un frottis du prélèvement pathologique. Ne pas le fixer.

  • Recouvrir la lame d'une solution filtrée de mercurochrome à 2% pendant 3 à 5 minutes

  • Laver à l'eau distillée

  • Colorer pendant 5 minutes avec une solution filtrée de vert de méthyle à 2%.

  • Laver à l'eau distillée, laisser sécher

  • Examiner à l'objectif 100

L eptospira

Les bactéries apparaissent en violet clair sur un fond presque incolore. Il est nécessaire de disposer d'un bon microscope et d'un observateur averti.

 

Préparation des réactifs :

  • Solution de mercurochrome à 2 % :
    Ajouter 1 gramme de mercurochrome broyé très finement (ou de rhodochrome RP) à 50 ml d'eau distillée tiède. Agiter, laisser reposer puis filtrer. Conserver en flacon brun en filtrant de temps à autre.

  • Solution de vert de méthyle à 2 % :
    Broyer très finement (important) 1 gramme de vert de méthyle dans un mortier, ajouter 50 ml d'eau distillée frémissante. Agiter, laisser reposer puis filtrer. Conserver en flacon brun en filtrant de temps à autre.

Ces réactifs se conservent environ un mois (voir les résultats sur les lames). D'autres colorations sont possibles pour colorer ces bactéries (coloration de Fontana-Tribondeau entre autre). Cependant, elles requièrent plus de réactifs, ils sont plus chers et se conservent moins bien.

 

 

 

 

 

Bonjour,

 

Quel intérêt de vouloir colorer des bactéries : (llesquelles ? ) avec des méthodes aussi exotiques ?

Vago 

Rhodes

Koster

 

Cela n'a pas beaucoup d'intérêt, mais pourquoi pas.

 

Je vois mercurochrome 2% ,:

Mercurochrome était un désinfectant  pour les petites écorchures de notre enfance.

De mémoire c'était de la "fluoresceine oxy mercurique di bromée" cette indication sur le flacon m'a assez fait rêver pour ne pas l'oublier..

Seulement le mercure est devenu "toxique" et le mercurochrome a disparu donnant son nom au laboratoire qui le fabriquait (Comme le Leica pour Leitz).

 

Amicalement.


  • 0

#4 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 08 janvier 2017 - 09:36

Merci pour les informations c'est juste que j'aurais aimé avoir le plus possible de colorant sous la main pour ne pas multiplier les commandes =) je sais que c'est exotique et ça semble compliqué mais c'est mon seul moyen d'analyse des bactéries avec un matériel de particulier ! Oui c'est prévu je commencerai par le bleu de méthylène ensuite de Gram et enfin les colorations un peu plus spécifiques . Bon du coup sa devrait le faire pour le vert de methyle se sera dans de l'acetone quoi pas de l'eau ...

Et vous en pensez quoi du microscope leica biomed gmb.... ? Vous pensez que je pourrai installer du CP dessus ?
  • 0

#5 patrice duros

patrice duros

    Procaryote

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Posté 10 janvier 2017 - 05:20

Bonsoir,

Comme l'a dit très justement Tryphon dans un précédent message on ne comprend absolument pas ce que vous voulez faire avec vos colorations ?

Quel est l'intérêt d'avoir des colorants pour réaliser une coloration de Köster utilisée, si ma mémoire est bonne, dans la coloration de certaines Brucella, voire d'hypothétiques Bortella, ou Rhodococcus...

Bref, pour vous aucun intérêt ...

Je ne parle pas de la coloration de Rhodes réservée à la mise en évidence des flagelles ?

En résumé, et pour tout dire je ne comprends pas votre démarche.

Le bleu de méthylène, me semble un bon colorant


  • 0

#6 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 11 janvier 2017 - 09:32

Bonjour c'est juste pour observer differentes choses de differentes maniére et j'aime bien etre original :)
  • 0

#7 savant Cosinus

savant Cosinus

    Homo sapiens microscopicus

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Posté 11 janvier 2017 - 10:27

Comme l'a dit très justement Tryphon dans un précédent message on ne comprend absolument pas ce que vous voulez faire avec vos colorations ?

 

 

... la réponse est pourtant claire... :) 

Bonjour c'est juste pour observer differentes choses de differentes manière ...

 

 


  • 0

#8 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 11 janvier 2017 - 10:55

Lool cosinus, je sais pas comment être plus claire , coloré pour observer des bactéries de manière un peu plus spécifique :) Mais c'est surtout pour commencer quelque part mon truc à moi c'est les bactéries :)


  • 0

#9 Tryphon T

Tryphon T

    oooOooo

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Posté 11 janvier 2017 - 11:11

Bonjour Julien,

 

 

 

Bonjour à tous , je cherche à avoir un Microscope d'occasion pas trop chère pour pouvoir explorer les bactéries, j'attend la bonne occasion on va dire , suite à cela pourquoi pas explorer les différentes flores commensales dont la pulmonaire qui m'intéresse tout particulièrement.

Je crois qu'il me faudrait un objectif à contraste de phase ( et sa coute chère !) et vu que j'ai un budget d'environ 300 euros je vais commencé par le Microscope et j'achèterai la caméra , l'objectif à contraste de phase et les colorants un peu plus tard . Merci pour ce forum pleins d'informations.  Julien .

 

 

 

Je crois qu'on tourne en rond ! (ou que tu nous fait tourner en rond?)

On a bien compris ce que tu veux faire, c'est ton droit.

Si j'ai bien compris tu n'as pas de microscope, tu n'y connais pas grand chose en microscopie, et tu ne sait donc pas t'en servir.

Commence donc par acheter un microscope, ensuite tu nous posera des questions de fonctionnement si tu as des difficultés.

Et en dernier, quand tu seras au point, tu pourras nous parler de colorations.

 

On ne te répondra sur la manière de labourer quand tu auras le tracteur ! (Version moderne de l'expression "il ne faut pas mettre la charrue devant les bœufs")

A plus tard ...

 

Amicalement.


  • 0

#10 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 11 janvier 2017 - 11:16

Okay alors à bientôt , cordialement . 


  • 0

#11 patrice duros

patrice duros

    Procaryote

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Posté 11 janvier 2017 - 04:07

Comme l'a dit très justement Tryphon : "Je crois qu'on tourne en rond ! (ou que tu nous fait tourner en rond?)"

Je n'ai rien à ajouter,

Cordialement


  • 0

#12 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 11 janvier 2017 - 05:21

http://dirlabosn.org...cteriologie.pdf

Je vais m'aider de ce PDF fort intéressant 


  • 0

#13 patrice duros

patrice duros

    Procaryote

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Posté 11 janvier 2017 - 05:25

C'est le document dont vous êtes servi pour poser vos questions, il y a deux jours...

Je n'ai d'ailleurs plus de commentaire à formuler sur ce sujet.

Qui est clos, pour ma part.

Cordialement.


Modifié par patrice duros, 11 janvier 2017 - 05:40 .

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#14 esquimous

esquimous

    Nucléotide

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Posté 11 janvier 2017 - 07:07

Tous à fait Patrice


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