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TPM-2 : CHROMOSOMES


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#1 Dominique Prades

Dominique Prades

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Posté 24 octobre 2005 - 10:55

Bonsoir à tous,

Je vous propose ce soir un deuxième "travail pratique" ,le premier étant les nauplies d'artémia salina.
Celui ci est un peu plus complexe mais à la portée de la plupart d'entre nous.
Il s'agit d'extraire les glandes salivaires d'une larve de chironome en vue de l'observation des chromosomes géants que contiennent celles ci.
Les chromosomes se situent dans les noyaux de toute cellule.Ils sont surtout visible quand celle ci se divise.
Il sont de surcroit facilement colorables et particulièrement gros chez certains insectes.
Les larves de chironomes,nommées improprement larve de moustique ou ver de vase se trouvent dans la partie supérieure de la vase des petits cours d'eau chargés en matières organique.
Vous pourrez vous en procurer aisément chez votre magasin spécialisé en articles de pêche, sous l'appellation de "fouilli" (il sert en fait à l'appât de la friture).A noter que les pêcheurs se servent d'une variété beaucoup plus grosse (15/20mm) pour monter au bout de l'hameçon.
Je vous explique tout celà car j'ai un peu peiné avec mes toutes petites bêtes de 8mm ,des larves plus grandes facilitant les opérations.

Il faut donc poser la larve sur une lame.Si elle est agitée (elle doit comprendre la suite de la manipulation
:( ), la calmer avec une bonne goutte d'alcool par exemple.Repérer la tête ,appuyer sur la partie postérieure avec l'ongle d'un doigt (pour bloquer l'animal) et tirer sur la tête (dans le sens opposé bien sûr) avec un outil tel que aiguille lancéolée,lame de bistouri très émousée.Il faut que les glandes salivaires soient arrachées avec la tête.

Pour la coloration des chromosomes,j'ai oeuvré avec du vert de méthyle acétique , mais du bleu de toluidine ou de l'orceine acétique sont également valables, tout comme la coloration de Feulgen .Je pense que le bleu de méthylène pourrait à la rigueur convenir .

Montage à la glycérine gélatinée
Les deux photos de ce message avec la webcam aiptek
Objectif X2 et X10


larve de chironome
io_filtered_filtered.jpg
les chromosomes

wcvfd_filtered_filtered.jpg



Quelques photos au X40 et ToUcam.On perçoit l'alternance des bandes sombres et claires des chromosomes,mais suivant le colorant utilisé,la perception de l'information visuelle sera différente.



chrom_filtered.jpg


chromo1_filtered.jpg

A bientôt
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