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Coloration: Bleu de Méthyle - Bleu de Méthyléne


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#1 Dominique.

Dominique.

    Purgatorius

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  • PipPipPipPipPipPipPip
  • 766 messages

Posté 22 janvier 2022 - 07:32

Pour répondre à Frank

 

Techniques  de coloration

              

Bleu de Méthylène

Le bleu de méthylène, ou chlorure de méthylthioninium, est un dérivé de la phénothiazine.

Pour la chimie de  ce colorant

https://fr.wikipedia...eu_de_méthylène

Pour la microscopie

Si on l’achète  en cristaux :

Bleu de méthylène 2 g

Alcool 95                  100 ml

Compléter à un litre avec de l’eau déminéralisée  et filtrer.

 

On peut aussi l’acheter tout  préparé.

 

Il colore en bleu les noyaux  (la chromatine  des noyaux).

Il est utilisable comme colorant vital placé entre lame et lamelle  pour colorer des protozoaires.

Ou -- pour des examens comme les cellules buccales.

      -- pour mettre en évidence  le système  nerveux  des animaux

S’ il y a sur-coloration  on peut faire régresser avec  une goutte d’ alcool 70.

 

Pour les colorations végétales

Colorer une dizaine de minutes dans la solution préparée  puis rincer à l’eau déminéralisée.

Il y a  un problème  car les enzymes contenues dans les cellules sont capables de réduire le bleu de méthylène ;  ce qui fit disparaître la couleur bleue au long cours.

On peut cependant allonger la conservation en si on déshydrate  la préparation  à l’alcool butylique  (butanol).

 

                                                        ************************************

Bleu de Méthyle

 

C’est un dérivé  de la triphénylrosaniline ou bleu d’aniline – c’est une très grande  famille .

https://fr.wikipedia...Bleu_de_méthyle

 

il s’agit d’un colorant acide.

 

Ce  sont des colorants  du tissu conjonctif  donc   grand intérêt en histologie animale.

Il  est  très proche  du bleu Coton  qui est un grand classique  dans les coloration  des préparations de mycologie.

 

Le bleu  de méthyle  colore  fortement   il ne  faut pas  le laisser  agir  plus de  30 secondes  avec un solution diluée  au ¼   . En cas de sur coloration  il  faut décolorer avec   2 gouttes d’alcool chlorhydrique.

Pour utiliser ce colorant il est nécessaire de faire un mordançage préalable  avec  une couverture de l' échantillon par acide Phosphomolybdique pendant 4 minutes - enlever le produit sans rincer  ni sécher  et mettre quelques gouttes de bleu dilué au 1/4.

 

   Mais la coloration est un art  qu’ il faut doucement maîtriser  par  la technique des essais / erreurs

 

   Ne pas oublier  d’ aller jeter un œil sur le site de MikrOscOpia   https://www.mik-mag.fr/

On y trouve beaucoup de réponses .

 

    Dominique.


Modifié par Dominique., 23 janvier 2022 - 12:20 .

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