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Nicolas Revelin

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Messages posté(e)s par Nicolas Revelin

  1. Re salut Olivier!

     

    Euh désolé j'ai pas du bien lire ton post avant de répondre tête baissée...

     

    Donc apparement tu compte colorer du pollen, et vu que ce n'est pas du tout mon domaine, je vais laisser nos amis te répondre!

     

    Au passage, la fabrication de la fuchine phénisée est la même que celle que tu as poster, mais pourquoi dois-tu la diluée?

     

    Est pour la coloration du pollen qui est plus "fragile"?

     

    Bêtement.... ;)

  2. Salut Olivier,

     

    Je suppose que tu veux parler de la coloration Ziehl-Neelsen :

     

    Tu as 4 solutions à préparer :

     

    - Fushine phénisée :

     

    -2.5 mL de cristaux de phénol fondus

    -5 mL d'alcool absolu

    -0.5g de fushine basique

    -50 mL d'eau distillée

    -Filtrer : utilise un filtre à café par exemple.

     

    - Alcool acide :

     

    -100 mL d'alcool à 70%

    -1 mL d'HCl concentré (dit "fumant", c'est à dire à 37%)

     

    - Bleu de méthylène (solution mère) :

     

    -1.4g de bleu de méthylène en poudre

    -100 mL d'alcool à 95%

     

    - Bleu de méthylène (solution de travail) :

     

    -10 mL de solution mère

    -90 mL d'eau distillée

     

    Voilà donc tes solutions préparée. La coloration se déroule comme ceci :

     

    - Passer au Xylol

    - Remonter les alcools (absolu jusqu'à 50%)

    - Rincer à l'eau distillée

    - 30 min dans la fushine phénique à 60°C

    - Rincer à l'eau courante

    - Décolorer avec l'alcool acide

    - Rincer à l'eau courante

    - Rincer à l'eau distillée

    - Bleu de méthylène à 0.1%, maximum 15 secondes

    - Remonter les acools (de 50% à l'absolu)

    - Passer au xylol

    - Monter la lamelle

     

    Juste un conseil pour la fuchine phénique à chaud, fabrique toi un support avec du papier alu (fond + 4 côtés) et tu immerge totalement tes lames sous la fuchine. Pense à rajouter du colorant régulièrement car à 60°C il s'évapore rapidement.

     

    Pour info le protocole que je te donne est celui des colorations des BAAR ( Bacilles acido-alcoolo-résistants, comme les bacilles de Koch ou les mycobactéries atypiques), micro-organismes classés P3 quand même...

     

    Tu cherche à colorer quoi?

     

    Amicalement

  3. Re,

     

    Il est vrai que le xylol ne doit pas être trés facile à trouver si on ne travail pas dans un laboratoire, cependant, certains baumes s'utilisent également avec de l'alcool isopropylique et même de l'alcool absolu dénaturé évidemment.

     

    Pour ce qui est des bulles d'air, nous avons été confronté à ce problème dans notre laboratoire car certaines de nos lame doivent passer dans un "robot lecteur", et les bulles empêchent le diagnostic. C'est pourquoi nous avons établi un protocole afin d'apprendre à coller correctement une lamelle sur lame.

     

    Cela ne doit pas bien changer de ce que la plupart des participants font, mais en tout cas nous n'avons plus eu de bulles, mis à part les cas ou le matériel est trop épais.

     

    Cordialement

  4. Bonjour à tous,

     

    Voici mon 1er post, ce n'est qu'une vue macroscopique de la lame, désolé, mais je n'ai pas encore eu le temps de me fabriquer un adaptateur pour ma webcam...

     

    (...paragraphe supprimé par le superviseur ...)

     

    Si ce genre de photo n'est plus la bienvenue sur ces forums, merci de m'en informer, je le comprendrai bien évidemment sans aucun problème...

     

    A propos du sujet présenté, c'est un foetus d'environ 10 semaines, issu d'une IVG.

     

    La coloration est une coloration de routine en histologie, Hémalun/Eosine.

     

    Cordialement

    post-655-1171484662_thumb.jpg

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