Dans le réfrigérateur il y a un pot de fromage blanc qui n’a pas été utilisé et qui est bien au-delà de la date de péremption.

Quelle est le type de cette moisissure ?

On se trouve devant un aspect feutré  de type laineux

En épiscopie x 80

Les têtes conidiennes ont  un aspect lâche de type appareil sporifère des penicilliums.

Examen x 200

   -        A- Conidiophore

                   B-   Ramification

        C-   Métule

        D-   Phialide

        E-   Conidies (sur image précédente ces Conidies forment des chaînes basipetales

Examen au x 1000

Les conidies sont plutôt rondes, elles ont un diamètre de environs 3 µm

La clé de détermination des pénicilliums est extrêmement riche. A mon niveau il m’est impossible de trouver le nom binomial.

Le genre Penicillium regroupe prés d’une centaine d’espèces acceptées selon Ramirez (1982).

Jean-Jacques

A la sortie du réfrigérateur  le pot de crème est ouvert. Une structure filamenteuse est présente. Certains endroits sont de couleur blanche et d’ autres de couleur noire.

 Cette moisissure est très fréquemment rencontrée sur des aliments un peu avariés.

Pour en faire une image, un prélèvement est réalisé. Ce prélèvement est coloré au bleu coton lactophénol et au rouge coton ammoniaqué.

A Conidiophore

B Conidies

Les spores sont de type elliptique et lisse. Elles sont autour de 11 µm

Cette spore permet d’évoquer Mucor Circinelloides.

 Mucor cosmopolite est l’un des mucors les plus communs.

Coloration rouge Congo.

A Columelle avec reste de la paroi du sporocyste

B Les hyphes sont segmentés.

Classification Règne    Fungi

Sous-division      Mucoromycotina

Ordre         Mucorales

Famille       Mucoraceae

Genre

Mucor

Fresen., 1850

L’infection (mucormycose) 

Rarement pathogène chez les personnes en bonne santé, mais cette moisissure peut provoquer des infections graves (mucormycoses) chez les individus immunodéprimés (diabétique, patients sous chimiothérapie, greffés, etc).

Symptômes : Selon la localisation de l’infection (sinus, poumons, peau, cerveau), les symptômes peuvent inclure fièvre, toux, douleurs, nécrose des tissus.

Traitement : Nécessite souvent une prise en charge médicale urgente avec des antifongiques (comme l’amphotéricine B) et parfois une intervention chirurgicale.

Utilisation industrielle : Certaines espèces de Mucor sont utilisées dans la production d’enzyme, d’acide organique.

Jean-Jacques

Les potirons   sont dans la cave depuis   le mois de septembre  - la pièce  est sèche  bien ventilée  mais  avec l’ arrivée  du printemps le moment  de répandre ses graines  est arrivé  Le moyen que le potiron  utilise   est le développement   de moisissures  ( Par quel  processus  les spores  de ces moisissures qui  étaient sur les téguments depuis  sa récolte  se  sont mises  à  se développer  au moment où le printemps arrive ? )

Ces moisissures vont détruire  et liquéfier  les téguments    permettant aux graines  de se libérer   et de recommencer le cycle de la  vie du potiron

Il semble y  avoir  trois types de moisissures sur ma citrouille.

Il est  toujours difficile  de déterminer le nom  des  moisissures   d’autant  plus que les lésions  entraînées  peuvent prendre  divers aspects

La tâche   blanche  feutrée  ( A ) nous  fournit  deux  indices

Les  hyphes    

Certaines   hyphes  vont développer    à leur sommet  une structure  le conidiophore

Les macrophialides  qui  se développent  sur la partie terminale de certains hyphes

Définition :  une phialide ( chez les champignons ascomycètes (Fungi), est  une cellule en forme de flacon composée d'un ventre et d'un col. Elle bourgeonne à partir d'un point végétatif du conidiophore et est productrice de conidies .

Les microphialides:

Les spores

A  les macroconidies :

B Les chlamydospores

Les chlamydospores sont des spores de multiplication végétative à paroi épaisse. Cette paroi épaisse leur permet de subsister d'une année sur l'autre sur le sol ou dans les débris végétaux en décomposition. Ils ne se détachent pas du mycélium assurant ainsi la conservation du champignon.

L’ensemble des éléments   oriente  vers la  Fusarium solani.

L’ étude  des deux autre colonies

En B je n’ai pas réussi à isoler  les phialides   par  contre  il y avait  les mêmes macroconidies   que  sur la colonie A

En C  là aussi  je n’ai pas réussi  à mettre en évidence  les phialides par contre toute la préparation  était   envahie  pas des  microspores .

                                                    *******************

Les  fusarium   sont  des moisissures très  fréquentes

Ce genre comprend près de 40 espèces

La plupart vivent dans le sol , ; certains  sont  phytopathogénes , d’autres  sont des parasites de l’ homme  et des animaux

Les fusarium peuvent produite  de dangereuses toxines .

Référence

Moisissures utiles et  nuisibles    de B Botton  et col  Editeur Masson

toxineshttps://njaes.rutgers.edu/E310/

Dominique.

Mais  quelle est l’origine de ces taches noires ?

La réponse  est donnée  par  des  coupes  minces à main levée microtome de Ranvier.  Coloration rouge Congo ammoniaqué.

Description :

Les hyphes sont septées  - hyalines .

Les conidies  sont  initialement en chaines,  de longueurs variables .Ces conidies  se séparent ensuite de leur cellule mère en emportant une partie de la paroi .

Leur aspect  est  de type cubique  puis  semble  modifier leur forme pour devenir sub sphériques

Ce type de conidies   se rapproche  de

la pourriture à Mycocentrospora (Mycocentrospora acerina)

https://alchetron.com/Mycocentrospora-acerina    ( dossier  image )

Mais il est n’est pas facile  d’affirmer  un diagnostic  à notre niveau de connaissance car il y a  d’autres   prétendants  à l’ origine  des tâches  noires  de la carotte :

Des symptômes similaires peuvent être   causés  par :

-------Rhexocercosporidium carotae (syn. Acrothecium carotae)

https://www.researchgate.net/figure/Conidia-conidiophores-and-conidiogenous-cells-of-Rhexocercosporidium-spp-A-Conidia-of_fig2_6176270

 mais dans ce cas les conidies ne sont pas  vraiment segmentées comme dans notre observation.

-------Alternaria radicina, autre nom  Stemphylium radicinum .

http://www.zor.zut.edu.pl/Skrypt-web/pages/Alternaria-radicina-XXX-34-6-r_jpg.htm

https://www.researchgate.net/figure/Alternaria-sect-Radicina-conidia-and-conidiophores-A-C-A-carotiincultae-D-E-A_fig26_256470096

mais dans  notre cas  les conidies sont très différentes.

 -----Berkeleyomyces basicol Autre nom  Thielaviopsis basicola.

https://www.pilzforum.eu/board/thread/52632-thielaviopsis-thielavioides-und-thielaviopsis-basicola/

Dans  cet article  on retrouve surtout   des conidies arrondies  ce qui n’est pas le cas de notre observation bien  que  les formes  rondes  soient présentes.

.

L’étude  des moisissures  est difficile  pourtant  elles sont présentes partout  dans notre environnement  et elles restent d’observation assez facile .Le bleu coton et le rouge Congo ammoniaqué  sont     des colorants  qui rendent ici bien service mais   dont on peut se passer.

   Dominique.

    Il y  a  sur le bord  de la mer à Grancamp- Maisy  ( 14 ) un vieux cimetière abandonné .

Certaines tombes remontent à la révolution française  - La pierre  est couverte  de taches blanches ;  ces taches sont mieux limitées  sur les pierres de granit des tombes   que  sur le  pierres  calcaires  de la vielle église .

Le toucher  de ces taches  est  dur, de types pierreux,  avec  légère tendance à la pulvérulence. On constate que  sur le mur calcaire la surface porte  des éléments verruqueux  de toute petite taille   de couleur  blanchâtre  par contre sur la pierre de granit  la  surface est lisse plus blanche  et fendillée.

                                                  Mur de l’église                                         Partie  supérieure d’une croix

Il a plu la veille ,  cette humidité   va  faciliter  le prélèvement avec une spatule métallique   en raison  de la très grande adhérence au substrat – on va se limiter à  l’ examen du lichen  qui  s’ est développé sur le mur de l’ église.

Face orientée vers l’extérieur examen  en épiscopie

L’ examen  en episcopie de la surface met en évidence  les soralies  ( A )  et à cette  période ( on est en Mai )  on ne trouve aucune apothécie.

Les soralies  correspondent  à l’ensemble des sorédies : ce sont des granules  qui vont permettre la reproduction  végétative des lichens  .

 Face profonde  sur le substrat :

    Le lichen  est indissociable  de la pierre  sur lequel il se développe  la partie  inferieure   est  donc  enduite  du calcaire de la pierre .(on parle de lichen hemi-endolithique ).

La première chose à faire avec les lichens  est de regarder leur  sensibilité  chimique:

La batterie  de test  contient

--le 1-4 paraphenyléne diamine   -P-

--lugol –I- 

--eau de javel  diluée à 50%    -C -

--solution  de potasse  saturée – K –

--acide nitrique- N-

L’eau  de  javel est le seul réactif a donner  une  réponse immédiate  - il apparaît une réaction  rouge  carmin  qui  disparaît en quelques  minutes  -

- Ce lichen  peut être classé C+ / K - / P- / I+/

Il  est possible  de réaliser  des coupes de ce type de lichen – après une courte  période  d’ humidification les plaques  prélevées  deviennent  plus souples  - il suffit alors  de les inclure  dans un moule  contenant de Peg  et de réaliser des coupes  fines  autour  de 80 µm au microtome.

Examen en épiscopie  au X60 sans aucune coloration .

A-Cette coupe sans coloration  met en évidence   la répartition  des algues assurant  la photosynthèse  et contenant de la chlorophyle  ( cette couche chlorophyllienne  n’ est pas visible  par une vue directe de ce lichen qui est de couleur blanche  - légèrement verdâtre si le lichen est humide).

-La médulle  est l’ensemble des hyphes fongiques  plus ou moins lâches situés  sous la couche algale  - chez ce lichen la médulle  est incluse  au substrat  ( ici du calcaire ).

La couverture extérieure :

La coupe  d’une sorédie  montre que sa constitution  est faite   d’un mélange  d’ hyphes et d’ algues  ( ce qui permet  que  les deux partenaires  du symbiote .soient sous l’ effet  du vent  de , la pluie  , des insectes    arrachés  et emportés en même temps )

Les  coupes  du lichen   sont colorées

Bleu coton / Rouge Congo ammoniaqué / Réactif de Melzer  (mélange d’iode + chloral).

Coloration au rouge Congo ammoniaqué :

Cette coloration  permet de mettre en évidence la formation de spores en surface ;

A très fort grossissement  on constate  que les  hyphes développent des structures  ressemblant à  des ramospores  ( ou ramoconidies )-  reproduction végétative-  https://forum.MikrOscOpia.com/topic/12624-les-spores-tentative-de-comprehension/?hl=spore

Coupe traitée par le réactif de Melzer :- (mélange iode +chloral )

Cette réaction colore en  jaune les hyphes mais  on ne trouve pas  de grains d’amidon. Cependant   Il faut noter la présence, dans les parois de certains hyphes, de la lichénine et de l'isolichénine, homologues de l'amidon.

Coupe  traitée par le Bleu coton :

L’organisation des hyphes  est mise en évidence :

A - hyphes de la zone  corticale  par contre  les algues de cette zone  ne sont pas colorées  et non visibles.

B – zone de la medulle : il est constaté que cette zone  est bien  limitée    vers la surface du lichen - comme  si les  hyphes  profonds baignaient  dans  un substrat. En lumière polarisée  il n’ y a  aucune polarisation comme on  aurait pu le penser  en présence de cristaux de Caco3  qui constituent  le  support .

Coupe  traité  par l’ Aslim III :

Cette coloration n’apporte pas d’information supplémentaire  mais elle permet de mettre bien en évidence  les cordons de ramospores et confirme que la medulle prend une coloration différente  de la région corticale  ( nature ?)

En conclusion : 

Thalle crustacé  à chloroccales ( algues vertes )

Limites par une ligne hypothalline blanche

Soralies  bien individualisées

Réaction colorée C + / K - / P-

Apothécies   non trouvées

Calcifuge 

Photophile 

   Probablement Varicellaria Lactea 

                    Sur la carte il est signalé  dans le calvados

Référence

https://www.universalis.fr/encyclopedie/lichens/3-nutrition-et-biochimie/

Guide  des lichens  de France  lichen des roches  tome 3  ( editeur Belin )

Dominique

Champignon des fruits :

Tous les ans une fois les pommes récoltées, elles sont  mises  à la cave   dans des cagettes   en une seule  couche .Tous les  ans  une partie des pommes est attaquée  par les moisissures  ( heureusement  une faible quantité   qu’il faut enlever  régulièrement  pour  protéger les autres).

Un prélèvement sur la zone veloutée  coloré au rouge Congo ammoniacal :

Cet aspect est celui de Botrytis Cinerea .

Résumé des deux images : Conidiophores grands, dressés, bruns à reflet métallique, très ramifiés vers le haut où ils produisent sur des renflements de nombreuses conidies.

Conidies entre 8-15 X ,6-10 µm.

Le botrytis a déjà été rencontré  plusieurs  fois  sur les framboisiers  - les poivrons  ce qui nous a permis de mettre en évidence  la transformation en sclérote  (  la forme de résistance de Botrytis au cours de l’ hiver ).

https://forum.MikrOscOpia.com/topic/17832-botrytis-framboisier/?hl=botrytis

https://forum.MikrOscOpia.com/topic/12475-botrytis-et-sclerotes/?hl=botrytis

On peut lire sur l’article de wikipedia ( ref 1).

Botrytis cinerea est une espèce de champignons nécrotrophes de la famille des Sclerotiniaceae, de la division des Ascomycota. Ce champignon phytopathogène est responsable de la pourriture grise, maladie cryptogamique qui sévit sur plusieurs cultures d’intérêt agronomique majeur comme la vigne, le tournesol, la tomate, la fraise. C'est un champignon également responsable de la pourriture noble qui permet d'obtenir certains vins liquoreux, comme le sauternes ou le tokay.

Botrytis  a  deux formes  La forme anamorphe  Botrytis Cinerea

                                        La forme téléomorphe Botrytis Fuckeliana

La  reproduction asexuée (sans fécondation)  se fait par simple mitose  et  formation de grappes de spores. La moisissure  que l’on vient de rencontrer  sur la pourriture de la pomme est donc classée Deutéromycète.

La  reproduction sexuée (avec fécondation) se fait  par méiose dans des asques donc classée  Ascomycète .comme la photo ci-dessous nous le met en évidence (Réf 2).

La forme sexuée peut être obtenue en conditions contrôlées en laboratoire mais n'a été que très rarement observée dans la nature.

Image de Botrytis Fuckeliana.

Références :

 Ref 1 : https://fr.wikipedia.org/wiki/Botrytis_cinerea

Ref 2 : https://www.asturnatura.com/fotografia/setas-hongos/botryotinia-fuckeliana-de-bary-whetzel-3/2349.html

Présentation de la méiose doucement expliquée :

https://www.youtube.com/watch?v=UWhXi35i1QE

Dominique

Champignon de la feuille.

L’automne est la période de ramassage des feuilles, leur examen  en est ainsi facilité  L’érable  sycomore  de la haie du jardin  a sur ses feuilles de  grandes tâches noires :

Cette maladie  est décrite  sous le nom de maladie des tâches noires de l’érable  .Elle  est attribuée à un champignon :Rhytisma ecarinum .Ces tâches sont d’environs 2 cm de diamètre ;

A l’examen de la feuille en épiscopie au X 40 :

La surface  noire  est ponctuée de formations  arrondies : les acervules .L’ acervule est une fructification asexuée se présentant l’ été sous la forme d'un conceptacle ouvert produisant de courts conidiophores et des conidies.  (ici l’acervule est fermée, la feuille est sèche donc l’ acervule ne fonctionne plus elle  nous présente  sa physionomie d’ hiver).

Des coupes dans la zone d’une acervule de la feuille   sont réalisées.

A – Clypeus : zones noires avec l’aspect d’une croute hétérogène dure  dont la fonction est la protection contre les rigueurs de l’hiver.

B –  Acervules  .La  coupe de l’ acervule ne montre pas vraiment  une  cavité   - mais nous sommes  en novembre .

D – Parenchyme de la feuille.

:

Contenu d’une acervule :

A --Conidiophores

B --Conidie  portée  par un conidiophore.

En novembre  les acervules ont terminé leur travail  de production de conidies ,leur rôle étant  de  contaminer les feuilles vertes durant l’été   - on en trouve de ce fait  très peu  sur une  feuille morte tombée au sol ( il faudrait  refaire l’ observation en été mais les feuilles du sycomore  ne sont pas facilement accessibles .

 L’organisme à ce stade était appelé autrefois Melasmia acerina. (Mais désormais c’est le nom de l’organisme sexué qui fait référence.)
Ces conidies vont pouvoir contaminer les feuilles  aux alentours  .En novembre le nombre de feuilles contaminées  est considérable sur certains arbres .

Suite du cycle :

A partir du mois de mars  /avril :

 . Après  une période de pluie la croûte  va se dissocier  et vont apparaître  des disques  d’ aphotécies  (Appareil reproducteur, en forme de disque ou de coupe largement ouverte, de certains champignons Discomycetes, notamment des lichens)qui porteront des conidies.

Cette phase sexuée voit le stroma  fabriquer des spores sexuées, les ascospores, via des structures microscopiques appelées asques.

Donc :

Les feuilles sont attaquées vers la fin de l’hiver/début printemps, lorsque démarre la feuillaison. Les spores, déposées par le vent, germent sur la feuille. Le champignon se développe sur la feuille, sans vraiment perturber la longévité de cette dernière, et sous sa forme asexuée. Ces spores asexuées peuvent infecter d’autres feuilles sur les arbres. Puis les feuilles vont tomber. Le champignon poursuit sa maturation en hiver, sur les feuilles au sol. Enfin, au printemps, c’est la forme sexuée qui se développe sur les feuilles au sol, pour infecter des nouvelles feuilles sur les arbres et le cycle est bouclé( ref 1)

En résumé  ( Ref 2

Références :

Ref 1 : https://naturealsacebossue.over-blog.com/2020/09/sur-une-feuille-episode-1-le-champignon-rhytisma-acerinum.html

Ref 2 : https://commons.wikimedia.org/wiki/File:04_03_16_life_cycle,_Rhytisma_acerinum,_Rhytismatales,_Ascomycota_(M._Piepenbring_%26_C.-L._Hou).png

Observation à poursuivre au printemps

                                 Dominique.

Champignon  du bois

En ramassant  les feuilles  sous  un  érable sycomore je découvre, sur une  branche morte,  de petites  formations  oranges  de taille  inférieure  à 2 millimètres.

Une coupe  d’un fragment prélevé  (écorce  et champignon).est réalisée.

Coloration   au rouge Congo  ammoniacal         Coloration  au Bleu coton lactophenol

Cette image colorée au bleu coton met bien en évidence  les hyphes  organisés  en rangées parallèles.

Image des Conidies :

 Image  en contraste de phase coloration au rouge Congo ammoniacal

Il s’agit de Nectria Cinnabarina

Les conidies  semblent septées   en 2  et en 3 éléments.

Il existe deux aspects possibles pour ce champignon. Au printemps  il  prend un aspect  de petite framboise ( cette image est  issue de  ref 1).

                                                                      --------------------------------------

Pour en savoir plus.

Texte extrait  des références -1 - 2- 3

Nectria cinnabarina, la Nectrie couleur de cinabre1, est une espèce de champignons ascomycètes de l'ordre des Hypocreales et de la famille des Nectriaceae

Ce champignon phytopathogène est responsable du dépérissement nectrien

Le dépérissement nectrien, ou maladie des taches coralliennes ou encore maladie du corail, est une maladie cryptogamique provoquée par ce champignon ascomycète de la famille des Nectriaceae, Nectria cinnabarina.

Cette maladie affecte les arbres et arbustes ligneux de nombreuses espèces, en particulier les pommiers, pêchers, framboisiers et groseilliers, mais aussi souvent les érables et quelques autres espèces telles que les ormes, les chênes ou les albizzia.

Elle attaque généralement les branches mortes, mais peut aussi se développer sur des rameaux affaiblis par diverses causes, grêle, gel ou blessures d'insectes.

Ce champignon  n’infecte pas le bois  vivant mais utilise souvent une plaie de l’arbre  souvent une section  volontaire  lors de la taille ou rupture d’une branche  pour une autre cause. Particulièrement  en période humide. les spores  vont  utiliser  les vaisseaux de l’ arbre  ( Xylème ) et envahir la plante ( il est  ainsi conseillé  de tailler  ses arbres en période  sèche  ).La pénétration  peut aussi se faire à travers  une craquelure de l’ écorce .

Cette maladie  va se manifester  par l'apparition sur le bois des rameaux de fructifications sous forme de petits coussinets de couleur  beige orange ou rouge vif d'un à deux millimètres de diamètre. La couleur varie selon l'espèce attaquée.

Cette famille de champignons  est à l’ origine de l’apparition de chancre sur l’écorce des  arbres infectés. Il attaque  lentement  les tissus  avoisinants , pouvant sur   des arbres fragiles être  responsable de leur mort  (  surtout  si l’ attaque  vient de Nectria galligena ) .

Ref 1 :https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Nectria_cinnabarina_18042009.jpg image de reference .

Ref 2http://www.oakleafgardening.com/problems/coral-spot-nectria-cinnabarina/   information.

Ref 3https://fr.wikipedia.org/wiki/Nectria_cinnabarina  information.

  Dominique.

Depuis pas mal d'années je cultive des tomates par goût et passion.

Mais ces plantes sont souvent victimes de maladies dont beaucoup de champignons.

Je me suis procuré une " bible" en la matière : Les maladies de la tomate de D Blancard.

Pour déterminer les champignons il utilise des photos au microscope - Du genre de celle ci :

( j'ai prise cette photo au hasard sur le net)

Voici ma question :

Comment fait on pour obtenir de telles photos a partir d'une feuille de tomate ?

J'ai cru comprendre que le colorant était du " bleu coton " ... mais comment s'en procurer ?

Et comment déposer le champignon sur la préparation !!

Voilà ! 

Dans cette présentation  on ne s’intéresse  qu’au  Kéfir de fruit . (  Il existe un  Kéfir de lait . )

Ma fille , chez qui  je suis  en vacances , me dit « papa  bois ça c’est  bon pour la santé – surtout  pour les intestins » ; le verre contient un  liquide  légèrement  jaunâtre , d’ odeur un  peu acidulée . Le goût  n’est pas  désagréable plutôt  sucré   avec un «  je ne sais   quoi »  en plus .Une fois bu elle  me dit c’est du Kéfir .

Elle me présente  un  bocal  à conserve d’un litre au fond duquel repose  une couche  de 3 cm d’ épaisseur  d’une  structure   à gros  grains surmontée  d’ eau    +  une datte .De la masse   se dégage de petites bulles .

Aspect  la masse  des grains   une fois la solution filtrée :

A la  binoculaire les grains  semblent    de structures hétérogènes:

Une fois  écrasé  entre lame et lamelle    l’hétérogénéité  se  confirme .

Dans un premier temps   un  étalement   est réalisé   sur lequel  on pratique  la coloration de Gram :

Protocole 

: Etalement de l’ échantillon

Fixation par  3 passages rapides  dans  la flamme d’un  bec benzène.

Violet de gentiane  (Cristal  violet)    laisser agir une minute – rincer à l’ eau déminéralisée.

Lugol     1 minute  - rincer à l’ eau  déminéralisée.

Décoloration  rapide avec Alcool 95  sur une lame inclinée  1minute  -   rincer sous un filet d’ eau déminéralisée.

Safranine  ou Fuscine   20 secondes  .laver doucement à l ‘eau déminéralisée.

Sécher   à 40°  (environ)   - 15 minutes.

Observation au X 1000.

Sur cet étalement on constate :

- des levures  gram+.( bleu).

-- des bacilles gram+. ( bleu ) .

--coloration  rose  de la substance  transparente du grain  de Kéfir .

--quelques   bactéries gram – ( rose ) .

Les  bacilles sont   de tailles différentes.

La population bactérienne  est donc  hétérogène

Si on regarde au  microscope un  grain  écrasé  entre  lame  et lamelle :

Les  levures  au X 200  sont bien visibles  en contraste de phase .

Elles sont regroupées  et baignent dans  une substance  translucide  ( au toucher les  grains  ont une consistance  modestement  ferme .) .

L’ examen  au X 800  et  au  X 1000 constate  que  ces levures n’ont pas  toutes la même  forme  - La encore – comme pour les bacilles  - il semble exister  plusieurs  populations  de levures  - Certaines  sont bien  rondes  - d’autres  franchement allongées .

Un examen  à fort grossissement    ( X 2000 )  permet le rappel des éléments anatomiques  d’une  levure .

La composition   bactérienne  des Kéfir a été  étudiée  :

Pour le Kéfir de fruit : on trouve    : Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactococcus lactis,  Saccharomyces cerevisiae,  Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus paracasei.

Pour le  Kéfir  de lait  on trouve :: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactococcus lactis, Lactococcus lactis biovar. diacetylactis, Leuconostoc citreum, Saccharomyces kefir, etc

Reste le mystère  de cette  substance   qui entoure la  flore (Levures et bacilles)

Elle serait de  nature  polysaccharidique ;  mais   qui  synthétise  cette  sustance ?

                                                              ********************

Le Kefir 

Le kéfir  de lait  est la plus ancienne forme de Kéfir  et remonte  à la  haute   antiquité Le mélange  lait  entier  de vaches , de brebis et de chèvres  est mis à   fermenter en présence  des  grains de Kéfir  pendant  2 à 3  jours  à température ambiante pour  obtenir  un  yaourt liquide .  (Mon expérience  à la cuisine  a donné  un yaourt   au goût  discutable mais  j’ai utilisé  les grains de Kéfir de fruit   donc  ne contenant  pas la flore  idéale  pour cette préparation ).

Par contre le Kéfir de fruit   revient à la mode  en raison de ses propriétés  probiotiques  et de sa capacité  à améliorer la flore  intestinale.

Donc pour  tous  ceux qui ont un  intestin  fragile voici la  recette  pour la préparation du kéfir de fruit  .

Mode de préparation :

35 grammes de grains  de Kéfir.

500 cc d’eau  ( les puristes  veulent  de l’ eau minérale ) .

3 à 4 morceaux de sucre  (canne  ou  betterave) .

1/2 rondelle  de citron+ 1 datte ou 2 figues sèches  pour le  goût.

Laisser à température ambiante   pendant 48 heures  Eviter de dépasser  4  jours –le taux d’alcool  monte avec le degré de fermentation  et le goût est moins agréable.

- Filtrer   pour récupérer  les grains   .

 Soit on recommence, soit  on  met les  grains en réserve  dans un peu  d’eau  sucrée . Le bocal est mis au réfrigérateur.

Boire  2 verres par  jour ou plus si affinité. Faire des cures prolongées.

Reste le  problème  de la manière  de se procurer les grains – ( Il faut noter que la croissance des grains  est très lente   - d’ où la nécessité  de bien  les récupérer entre chaque préparation )   - La tradition  veut  que les grains  soient donnés  par quelqu’un  qui vous veut du bien  - La chaîne  ne s’ est jamais arrêtée  depuis  plus de 2000 ans .

Pour tout  savoir sur le kéfir :

https://fr.wikipedia.org/wiki/K%C3%A9fir.

                         Dominique.

Il y a  quelques mois  un article parlait de l’ intérêt de la courge du Siam  .Autrefois les marins  emportaient  des courge en raison  de leur capacité de conservation tout à fait hors  normes  - Ces courges se  conservent sans  problème  2 ans  sans altération  de leur qualité  -Mais la conservation  n’est pas  toujours parfaite  .L ‘hiver a été humide  et certaines  de mes courges ont pris  un curieux aspect :

Quand on prend dans la main  la courge attaquée   , elle n’a plus de poids ; Elle est devenue très sèche.  Et comme vidée..
Un essai  d’étude de la moisissure par prélèvement  direct  n’a pas  donné de résultat utilisable. De ce  fait une mise en culture a été décidée. Les  moisissures poussent   bien sur  un milieu  d’Agar – Agar enrichi en Saccharose  et divers  ions   - le milieu de Czapeck .

Après   6  jours à 20 °   :

On constate   2 zones de coloration  différentes     une blanche et une ocre

Le prélèvement dans le feutrage  blanc révèle la  moisissure suivante :

A – Conidiophore

B – Phialide

C – Conidie

Le prélèvement dans la  zone ocre  révèle la moisissure suivante :

A – Hyphes.

B – Conidiophore.

C – Phialide

D –  Collerette

E  -- Conidie

A – Hyphes.

B – Conidiophore.

C – Phialide

E  -- Conidie

Dans le milieu de culture  on trouve  l’enchevêtrement des hyphes :

 A – Chlamydospore ?

Les spores : deux  types :

IL existe  donc deux espèces.

Il est possible de trouver les genres mais définir l’espèce  n’est pas possible.

La première colonie    est de couleur  blanche .Les conidiophores sont  simples  - hyalins .Les phialides  s’organisent en verticilles ( qui ressemblent aux rayons d’une roue ) sur plusieurs niveaux.
A l’extrémité des phialides  se situe  une spore  ( Conidies )  elliptique  de 4µm X 1,9 µm .Ces spores sont solitaires .

On se trouve devant le genre Verticillium.  Il existe plus de 18 espèces .Cette moisissure  à une large distribution  .On la trouve  sur les végétaux en  décomposition  ( A noter que  certaines  espèces peuvent être pathogènes  pour les  insectes   et rarement  pour les  humains ).

La seconde colonie  donne  ici une colonie  orangée .Les hyphes sont  fins et hyalins .Sur ces  hyphes se  développent des phialides  simples   érigées  comme des poinçons  - Au sommet on trouve une petite collerette .Les spores  ( conidies )  sont  uniques   d’ aspect cylindrique  . Cette Moisissure produit parfois des chlamydospores   (forme de spores  résistante  aux conditions  climatiques défavorables).

On se trouve  devant le genre Acremonium .Ce genre comprend 70 espèces  (Le diagnostic différentiel avec le genre Philamonium est difficile) . Cette  moisissure   est très répandue   -  Elle se trouve sur des substrats  divers .Elle  élabore plusieurs  antibiotiques dont les  Céphalosporines  ( antibiotique  très utilisé en médecine ).

Reference  

Moisissures  utiles et nuisibles   B Botton et col  Editeur Masson

Dominique ;

En faisant des recherches pour écrire un livre, j'ai trouvé la trace d'aquarelles (de champignons !) du milieu du 19è siècle. Ceux qui possédaient ces aquarelles cherchaient un mycologue pour écrire un texte pour les accompagner.

Ce qui a été fait. Après un an et demi de travail, ce libre est maintenant disponible (gratuitement) sur le site de l'association aux activités de laquelle je participe : l'Association des Naturalistes des Yvelines : https://www.siteany78.org/spip.php?breve95.

Si vous aimez les images (anciennes) vous pouvez facilement le télécharger.

Tous les commentaires sont les bienvenus.

Bien cordialement

Mi février   - La température  est  particulièrement  clémente  et les abeilles,  qui à cette période  hibernent   au fond de la ruche, ont  repris  leur activité – La présence d’ ‘eau dans la ruche   est  indispensable pour les divers travaux  et les abeilles vont  chercher  l’  eau dans un petite marre  à  quelques mètres de distance – Il y en   a toujours un  certain  nombre qui  se noient .

  La température de l ‘ eau est de 4 degrés  le matin – Autour des  cadavres des  insectes se sont développés   des filaments   - Ce phénomène est  bien   connu  - et il est en rapport avec le  développement  de  micro-organismes   : Classe : Oomycétes     et  Genre Saprolégnia . Habituellement la  couleur   des filaments  est   blanchâtre,  transparente   - mais  dans le  cas  présent la  couleur   est  orange.

En épiscopie:

Cette observation  conduit à deux  recherches :

1 – Pourquoi la  couleur orange ?

2 – Comment  se  multiplie  cette moisissure ?

Pourquoi la  couleur  orange ?

La réponse  est rapidement apportée.

On retrouve  Haematococcus  Pluvialis  dans  ses  deux aspects  ( actif  et kystique ) qui  a déjà été discuté  sur le  site  avec Pierre  et  Pablito et les précisions  scientifiques de  Solito de Solis.

http://forum.MikrOscOpia.com/topic/17346-eau-rouge/?hl=%2Balgue+%2Brouge&do=findComment&comment=69442

La couleur  rouge  est liée  à la présence  d’un pigment L’astaxantine  synthétisé par ce Protozoaire .

Comment  se multiplie cette moisissures ?

Le texte pris comme référence et pour  comparaison  est issu  de:

http://www.biologydiscussion.com/fungi/life-cycle-of-saprolegnia-with-diagram-oomycetes/63299 Les schémas  sont  aussi extraits de  cette publication.

Et c’est là où la difficulté apparaît : Ce que dit le texte  et ce que  je vois sur le déroulement de la fabrication de  spores  ne correspondent  pas  - Donc  je  me trompe mais pourquoi ?.

Exposition  du  dilemme

La  première  étape  est  la  fixation des  spores sur le cadavre de l’insecte .

Cette fixation est  réalisée  à l’aide de  Rhizoïdes  qui assurent l’ancrage  et la  prise des  nutriments  venant  de  l’insecte.

La seconde étape  est le développement des Hyphes dans toutes les directions :

Coloration   : Bleu coton lactophénol.

:

:

Ces hyphes sont longs  très  fins  et divisés. ils n’existent pas de septum  qui les sépare en segments  et le cytoplasme  est de ce  fait multi nucléé ( Coenocytique ) . Les  Hyphes  sont faits de cellulose   et non de Chitine.

Reproduction :

La reproduction  se  fait de  deux manières  - végétative et sexuelle

Reproduction  végétative :

A- par  fragmentation   les hyphes  se cassent en morceaux de longueurs  variables  - chaque morceau  se développe  avec  division  nucléaire.

B-  par formation de  spores

A l’extrémité  des  hyphes se développent des    structures en forme de massue. Ces gonflements de la  partie  terminale des  hyphes contient  de nombreux noyaux   et  des nutriments  ( Zoosporange )

L’étude a été faite en contraste de phase.

A ‘l’intérieur  se développent  lentement des  spores  plus ou moins rondes.

Selon les  descriptions cette partie   distale   renflée   de l’  hyphe  va se décrocher   pour donner  une structure  appelée   Zoosporangium  de forme    tubulaire   ou  en haltères . Ce qui n’est pas   le cas  dans cette observation   où  la partie terminale de l’hyphe  se  vide sans  se décrocher .

erreur:  X200

erreur:  X 200

Normalement  ces spores sont des Zoospores   avec  deux flagelles    qui  ne sont  actives  que très peu de temps .Sur ce point  les spores  trouvées   ne semblent pas avoir de flagelle .

Mais il y a  ici  une difficulté :   la forme Zoospore avec flagelles  s’étend   sur une période  très courte  et  donc pas facilement  identifiable.

Une photo au moment de la ponte : Flagelles ?

Les spores  sont  rondes  .

 Il est dit que cette première  spore  va rester  immobile  quelques  temps  puis   de celle-ci  va émerger  une autre  Zoospore  .Cette  seconde  spore  va  à son tour   entrer en  latence  puis  se mettre  à germer    en fonction des paramètres extérieurs .

Or dans  cette observation  ces spores   se mettent à germer   très  rapidement à germer.

.

Schéma des phases  de développement végétatif de Saprolégnia

 Après  le développement  du premier Zoosporangium    qui  s’ est vidé  le processus  recommence avec le développement  d’un second Zoosporangium .

La reproduction  sexuelle :

Cette observation  n’a pu mettre en évidence   ce processus. La reproduction  sexuée est difficile à  observer   et les  études  ont été  faites  non pas  sur des milieux  naturels  mais   sur  des milieux de culture  ( Boite de  Pétri  et graine de chanvre ) .

La reproduction des Saprolegnia   est résumée    dans le schéma suivant :

Cette observation  est intrigante  mais  elle montre que pour    découvrir  toutes les phases  du développement      d’un végétal  il est nécessaire de multiplier les observations  et de  faire modifier  les conditions  de développement   .Dans le  cas de Saprolegnia  il a fallu mettre au point des milieux de culture  et développer des techniques  expérimentales .

Donc  cette observation  approche le  processus   mais  n’obtient que quelques images   et pas la totalité du film .

 D’  un point de vue économique   l’étude de ces Oomycètes   est  importante   puisque Saprolegnia  attaque  les poissons  -

Classification :

Règne   Chromista

Division Oomycota

Classe   Oomycetes

Ordre    Saprolegniales

Famille Saprolegniaceae

                Saprolegnia

                                           Dominique .

Depuis  quelques  semaines   les séneçons du  jardin  sont couverts  de  rouille – il en est de  même sur les poireaux - Ce sujet avait déjà été traité  dans MikrOscOpia .

http://forum.MikrOscOpia.com/topic/15299-rouille-poireau/?hl=%2Brouille+%2Bpoireau

Il était  intéressant  de comparer  cette atteinte  du  Séneçon avec celle  du Poireau.

Le  séneçon  fait  partie des «  mauvaises herbes  du jardin »  .Ce adventice  ne gêne pas  beaucoup  et  elle  est facile à sarcler .

Aspect en  éclairage  épiscopique :

Les sores   qui se développent  sur les   feuilles sont  ouverts    et  laissent échapper  2 types de spores.

--des spores halines  en périphérie.

--des spores orangées au centre.

 Pour comprendre l’organisation   on  réalise des coupes de tiges et des coupes de feuilles :

Coupe de feuille :

 Coupe de  tige :

 L’ examen  de ces sores   à plus fort  grossissement 

X 400 ( coloration  Wacker  Asim      Astra bleu  2 minutes et décoloration  à l ‘alcool acide):

Cette image correspond  aux spores  orangées  qui sont libérées  pas la zone centrale  du sore .

Cette photo  correspond à la zone périphérique  des sores     d’où sont libérées les  spores blanches (A)   ( ici colorées  en vert  par le Wacker Asim   Astra bleu  30 secondes  et décoloration  alcool acide  ) .

Coloration du  sommet de la colonne des spores avec le Rouge Congo ammoniaqué :

L’aspect  des spores : X 400 et au  x800:

Comment  interpréter  toutes ces images ?.

Nous  sommes  au mois d’ octobre   dans sa deuxième  moitié  - en ce moment le  temps  est très  doux   mais  habituellement  c’est la période de froid      avec  un temps  gris et les premières gelée au lever  du jour   (du moins   habituellement  jusqu’ à ces dernières années ).

Tout cela  pour dire  que normalement les rouilles  produisent  les  spores d’ hiver  Celles qui  vont résister  au froid  et à l’ humidité.  Ces spores sont les téleutospores .
L’ été  pour favoriser   un développement rapide   se forment de manière  végétative   les urédospores .

Ici tout   se passe comme  si  les deux  formes  se fabriquaient en même  temps.

Ce fait a été noté    dans un  article   portant sur le même sujet /

http://www.lenaturaliste.net/forum/viewtopic.php?f=208&t=17844&start=0

De quelle  champignon s’ agit il ?

Le Coleopsorium Senecionis    a   un cycle complexe   comme  la majeure partie des rouilles 

 Deux  hôtes  sont  trouvés  dans le cours du développement :  le  Pin   et le Séneçon

Mais il existe un  grand nombre de plantes de la  famille  des Campanulaceae, Scrophularaceae  sur lesquelles  vont se développer Coleopsorium Senecionis .

Résumé   du cycle :

Le cycle commence  sur les  aiguilles de Pin sylvestre  et de Pin  noir.

 Sur les épines de pin se forment les Ecidiopsores .

Ces spores  vont être transportées  par le vent  vers un  deuxième  Hôte  - soit  les Séneçons -  soit le Tussilage.

Se forment  alors 

--des Urédospores de couleur  jaune  - orangée     à développement  rapide ( végétatif )  qui vont favoriser  la prolifération  du  champignon .

--des Téleutospores  transparents  qui vont  lui permettre de passer l’hiver.

Au printemps la  germination sur le sol  des  Téleutospores   vont  donner  naissance à des Basidiospores (4 basidiospores)  qui vont coloniser les  aiguilles de Pin.

Durant le printemps  se développent  sur les  aiguilles  des Pycnides  qui  contiennent  des filaments :

--grêles et allongés  les Trichogynes  .

--plus courts  à l’extrémité bourgeonnante  les spermaties.

Les spermaties    vont féconder les Trichogynes  d’une  autre feuille   .Les cellules  fécondées  vont  donner  naissance à  des structures plus volumineuses  les Proécies  qui donneront naissance  aux Ecidiospores .

Le problème  posé  par cette observation  est   que selon  le livre Microfungi and land plants les sores    donnant  naissance  aux urédospores   sont    orangés  et ceux   donnant naissance  aux téleutospores  sont transparents  - Ici on  trouve que les deux spores se forment dans le même sore   l’un au centre  - l’ autre en périphérie  .

Classification :

Domaine : Biota

Règne : Fungi

Phylum : Basidiomycota

Ordre : Uredinales

Famille : Coleosporiaceae

Genre : Coleosporium

Espèce : Coleosporium senecionis (Pers.) Kickx

Synonymie :

Coleosporium tussilaginis f. sp. senecionis-silvatici Boerema & Verhoeven (Espèce CD_NOM = 509919)

Peridermium oblogisporium Fuckel (Espèce CD_NOM = 509920)

Uredo farinosa var. senecionis Pers. : Pers. (Espèce CD_NOM = 509921)

Références :

Les champignons  P Boucher  et col Masson .

Microfungi on land plants  MartinEllis and Pamela Ellis .

                                                               Dominique

 Dans les années 1960  alors  adolescent   j’avais entrepris une collection d’insectes .Ce n’était  pas  difficile   les insectes ne manquaient  pas   sur   les prairies et dans les  sous-bois.

Les boites  , en presque  50 ans , n’ont été ouvertes  que de très rares fois  et pas  depuis  8 ans. Elles sont  entreposées dans   un grand carton   bien au sec.

Il y a 8 jours  à la demande  des  petits  enfants  j’ai retiré les boites  de leur protection   .Et là une découverte   désappointante : la boîte des  coléoptères  montre quelques spécimens  couverts  d’un enduit soyeux   blanchâtre. – Par contre les  autres  boites   ne sont pas atteintes.

Il y a  donc  une moisissure qui s’est développée  avec   une extrême  lenteur   dans un  milieu  très aride. Quelle est sa nature ?

Etude à la  binoculaire :

Cette moisissure   de couleur  blanche,  crème  forme    des globules  au sommet des conidiophores.

Prélèvement    dans une goutte de  lactophénol  et coloration  au bleu coton lactophenol

L’aspect est celui  d’un aspergillus.

Cet aspergillus possède  deux formes de têtes :  des sporifères  bisériées et des têtes  sporifères  monosériées .

Les spores :  Elles  ont un aspect lisse  - mais à  très  fort grossissement  elles apparaissent porteuses de raies très régulièrement dessinées  .

Il semble s’ agir d’

Aspergillus Candidus

  Ce champignon  est répandu dans le sol ,    il  est fréquent  sur les milieux peu hydratés     ( en particulier sur les céréales  ensilées   . il est considéré à ce dernier titre  comme un  agent actif d’ échauffement  de la masse  ensilée .
Cette moisissure est xerotolérante  (  donc elle  se développe dans des  milieux trop secs pour être colonisés  par  les bactéries  ) .
Les moisissures  sont dans l’ ensemble  indifférentes   à la présence  de lumière ce qui  explique  le développement dans les grottes  (Surtout  les Tubérales ) .

Il contient de l’ acide Kojique  ( utilisé dans la nourriture  et  les cosmétiques ) https://fr.wikipedia.org/wiki/Acide_kojique

Il  contient aussi de la  canduline  ( qui est une  mycotoxine )

http://ethesis.inp-toulouse.fr/archive/00000577/01/tabuc.pdf

 Le  feutrage est facile  a enlevé  avec un coton tige imbibé d’alcool. Et  l’insecte ne semble pas trop altéré.

Pour empêcher le  développement des moisissure   ou leur récidive  il est conseillé  d’utiliser  du créosol de hêtre .

   https://www7.inra.fr/opie-insectes/pdf/i93perron.pdf

Le Créosol de Hêtre imbibe  un coton  qui  est placé  dans un angle de la  boîte.

   Ce produit est  toujours commercialisé :  http://www.allsciences.com/catalogue/10-multilabo/2-loisirs/198-entomologie-tout-le-materiel-pour-chasser-conserver-les-insectes/1044-creosote-de-hetre-fiole-de-sauvinet/p-1528-creosote-de-hetre-30-ml-pipette.html

                              Dominique .

L’article  N°1   portait sur « Erysiphe Alphitoide »   décrit dans   la  forme  Teleomorphe de cette  moisissure  - REF  -   http://forum.MikrOscOpia.com/topic/13279-o%C3%AFdium-du-ch%C3%AAne-erysiph%C3%A9-alphitoides-ex-microsphaera-alphitoides/?hl=%2Boidium+%2Bch%C3%AAne

En réalité les  Erysiphales sont actuellement observables sous  deux formes (anamorphe et téléomorphe)

Si  vous  regardez une feuille de chêne couverte d’un  feutrage blanc à la rechercher  de  Cleistothéces ( forme Teleomorphe )  vous allez  être souvent  déçus car la forme Anamorphe ou imparfaite   est la plus  fréquente .

Ce champignon  a été  introduit en  France  vers la fin du 19 éme siècle . Il a fallu attendre le début du  20 éme siècle  pour que la forme  Teleomorphe soit décrite  pour la première fois  en France .

C’est  la forme imparfaite ( la plus fréquente donc  ) que   j’ ai rencontrée  dimanche dernier .

Présentation :

Aspect macroscopique :

 Le feutrage  blanc est retrouvé sur les feuilles  avec une dominance sur la face supérieure.

Aspect  en episopie :

En épi scopie ( X 80  )ce feutrage  est  constitué d’ un nombre important de conidies   ( qui sont  des cellules unies ou multinucléées, résultant de la fragmentation  puis de la désarticulation  du mycélium d’un  champignon)-

Ici on constate  que ces  conidies sont  situées  au sommet de phialides .Chez les  champignons imparfaits (forme végétative - asexuée) ce mot : phialide ,désigne une cellule  spécialisée  vouée à la production de ces conidies  ( Spores .  Souvent  cette production se fait en chapelets .La production  de conidies par le bourgeonnement des   phialides  est  illimitée .Dans le cas  présent  les  conidies  semblent se détacher  rapidement de leur lieu de fabrication . Elles restent  ensuite  plus  ou moins adhérentes entre –elles .

Dans ce cas  aucun Cleistothéce  n’est trouvé.

Aspect microscopique –

Examen en champ clair : coupe  de la feuille dans sa partie atteinte .

L'atteinte  fongique   se développe  sur les deux faces de la  feuille.

Examen en contraste de phase : X 400

Dédicace : à Jérome, notre spécialiste mycologue sur le forum

Petite sortie ce jour pour visiter une exposition organisée par des mycologues.

Il y avait même des microscopes, Pablo était ravi : 

On a été gâtés, nous avons ramené des petits bouts de champignon à regarder.

Nous vous présentons ici Tuber Brumale, une variété de truffe.

Classiquement une première coupe nous permet de voir les asques, contenant des spores, la versoin en lumière polarisée est assez chouette : 

Nous avons ensuite réussi à isoler des asques pour mieux les analyser.

En détaillant les spores dans les asques, nous nous sommes aperçu que si la plupart des spores étaient remplies avec une seule cellule, d'autres étaient remplies avec des cellules multiples déjà en division ???

Bonne soirée, Pierre et Pablo

                                                                  Un curieux péridium

Quand on parle de champignons, viennent à l ‘esprit des images  du type  Bolet  ou Vesse de loup  aux autres macromycetes , peuvent  aussi venir les images feutrées  des moisissures multicolores  - mais pas celle des microchampignons .

Pour trouver des myxomycètes ,  j’ai lu qu ‘il suffisait de mettre des  feuilles  mortes  dans une boite  et d’y maintenir   l’humidité. Je me suis  donc construit un  petit terrarium   qui permet   une stabilité de l humidité  et de la température  et qui reste exposé à la lumière du jour.   Les feuilles mortes , ajoutées à quelques vieilles écorces  qui traînent dans le bois  voisin,   sont placées  à l’intérieur,  je vaporise de  l’eau tous les  2  jours.

Après  quelques  jours de surveillance   apparaissent   sur les  écorces  des  petits  boutons jaunes – orangés   qui  croissent  rapidement   pour ne plus évoluer.

Aspect macroscopique :

Dans le livre sur les myxomycètes  cet aspect pouvait correspondre à une des espèces de Trichia

Mais la coupe  met en évidence une structure  qui n’est pas celle  d’un myxomycète 

Examen   d’une coupe  fine  colorée au bleu coton lactophénol .

 1 - Dans la zone périphérique  il  n’existe qu’un  seul type de  cellule  .

2 -Par contre  dans la zone centrale  il en existe  2   types cellulaires    ( spores ) dispersés dans une masse de tissu  non cellulaire.

Il existe  aussi des hyphes ,en apparence cloisonnés , en très faible abondance .

Nous nous trouvons devant  une structure  qui ressemble   à celle de la Vesse de Loup   ou du Scleroderme  .

-Un sporophore (qui contient les asques  et donc les spores )  globuleux .

-Un péridium  ( enveloppe externe  ) légèrement granuleux.

-Un tissu fertile ( glebe) constitué de spores disséminées dans  un tissu de soutien .

-Les hyphes sont cloisonnés.

Mais tout  cela  à  une échelle de taille  très  basse  au-dessous du millimètre .

L’observation  ne  trouve pas d’asques  constitués  .

Pourtant la forme du sporophore le fait rentrer dans le cadre des Ascomycètes .

L’hôte  permet souvent de préciser l’espèce  qui  le colonise mais  dans ce cas je n’ai pas  fait attention à mon prélèvement  et l’écorce a été ramassée  sur un  tas de bois coupé et mélangé.

Une recherche dans   Microfungi on land plants ne permet pas d’aller plus loin dans la section Ascomycètes on Wood and bark .

Ce qui étonne  dans cette observation est la structure du peridium qui  n’est pas fait d’ un amas d’hyphes  entrelacés  mais  d une 'apparence de  cellule parenchymateuses   ; Il faut  alors admettre que les hyphes ont évolué   et  pris   un  aspect globuleux   plus ou moins polyédrique  comme on  peut le rencontrer dans les plectenchymes. ( faux tissus  fait d’hyphes juxtaposés ) .

                            Dominique

( 2 éme  épisode du cycle  de la rouille  )

La présentation de la rouille du poireau nous a  permis  de prendre connaissance  de  cette maladie fungique .

http://forum.MikrOscOpia.com/topic/15299-rouille-poireau/

. Dans  cette présentation  nous avons appris  qu il y  avait   deux  hôtes  en  présence : le poireau  et l’épine vinette ;  le poireau est  le premier  hôte celui  sur lequel va  se  réaliser   la reproduction sexuée avec la  formation  d une téleutospore  (2N chromosomes). Cette spore va tomber sur le sol et donner  au printemps   4  basidiospores ( N chromosome.) .

Avec  la présentation de la  rouille du poirier  l’occasion se présente de compléter le cycle   .

Il  ne s ‘ agit pas  du même champignon : Puccinia alli  pour le  poireau  et dans la  présentation de ce jour  Gymnosporangium sabinae ;  mais ces deux champignons ont le même  type de cycle. Ici le second hôte n’est pas l’épine  vinette mais  le Juniperus  -( Genévrier .)

Le cycle  change d’ hôte  à partir du moment  où  le téleutospore tombe sur le sol .

Dessin modifié issu de ref 1 –ici Téleutospore du genévrier .

Cette nouvelle histoire  va partir de ce point  ou plus exactement   de l’étape  suivante :  Les  Téleutospores  donnent  naissance  à 4  Basidiospores , ces spores sous l’ effet  du vent  vont atteindre les feuilles du poirier .

Le mois de mai est arrivé .

La Basidiospore  va atteindre la  feuille du poirier  et développer  la première atteinte de la feuille. Son développement  se fera sur la face supérieure de la feuille .
Le  premier  symptôme  est l’ appartion  de tâches  orangées .

Au milieu de la tâche  de couleur rouille  vont se développer entre mai et  juin  des  petites structures noires : les Pycnides  .

Si on ouvre   une pycnide  il existe à l’intérieur une quantité considérable de micro spores : les Spermaties.  et de petites structures allongées  les Trichogynes .

--Les spermaties seront emportées  par le vent  et par les insectes  ( présence sur  les pycnide  d’ une substance  sucrée  attractive ) pour rencontrer sur une autre feuille  une trichogyne de polarité différente  ( et  ainsi  former un dicaryon – voir  présentation précédente  ) .

--Les trichogynes attendent l’arrivée  d ‘une spermatie de polarité différente   de la sienne qui viendra  d’une  autre pycnide.  ( pour former  un dicaryon  là encore )

Sur la  photo de droite  ci - dessous  on constate  de  très  petites cellules ( 4,7 µm )gonflées par une grosse vacuole et une cellule    binucléée et une cellule qui semble binucléée . ( dicaryon ? )

                                                                                    ***********************

Le mois de juin est arrivé :

Le nouvel épisode  se déroule  maintenant  sur la face inférieure de la feuille .

A partir de ce moment  les  hyphes  de Gymnosporangium sabinae  vont coloniser  la feuille  de part en part  ,

Pour apprécier la modification d’ architecture  on compare  une feuille normale  et une  feuille atteinte .

Coupe d’une  feuille   de poirier  normale ( coloration Wacker )

coupe d’une  feuille atteinte ( coloration  vert d’Etzold ) .

 La couche palissadique est encore reconnaissable  mais la  zone vasculaire  et la  zone lacuneuse  ont perdu  toutes  leurs caractéristiques anatomiques ; A la place  il y a  une prolifération d’hyphes   ; la construction  est réguliers les hyphes sont parallèles les unes  aux autres  .  Le résultat  est un épaississement très important de  la feuille.

Pour  avoir une idée  de ces hyphes  il est réalisé une dilacération de ce tissu cellulaire  .

Coloration au  rouge Congo ammoniacal :

Ces hyphes sont segmentées  et contiennent de nombreuses granulations

Les moisissures  sont connues  pour leur activité  biochimique. (. Par contre  je n’ai trouvé aucune notion sur la nature  de ces granulations) .

Deuxième stade : la formation des écidies :

Vers le mois d’août apparaissent   dans ce  tissus  fungique des cavités  les Proécies   qui vont   grandir puis    s ‘ouvrir  vers l’extérieur   : les Ecidies  ..

Aspect  macroscopique

 Aspect des Proécies puis Ecidies - Les coupes ayant été faites  tardivement  ( octobre   ) dans le processus évolutif  on trouve  surtout   des écidies et non plus  la forme initiale de cette  structure qui est la Proécie .

Aspect microscopique :

 Au stade proécie la structure est encore  à peine visible sous  la feuille .

Au stade écidie  la construction est terminée, l’aspect est celui de la photo ci- dessus.

Développement de l ‘écidie ( les spores sont absentes en raison de la technique de préparation ) .

Les hyphes  s ‘allongent  et   vont permettre l’ouverture de l ‘écidie. Cette ouverture se réalise  par le soulèvement du sommet de la proécie  sous la pression des hyphes en croissance.

Ces  hyphes   ont une paroi   finement granuleuse  et des épines. Elles  sont très différentes des  hyphes que l’on  a  rencontrées  à la phase initiale du développement de la rouille.  .

La formation des spores :

Il faut enfin regarder le fond de  l’  Ecidie pour découvrir la formation des spores

Les Spores  dérivent d’  hyphes particulières  formées  par  une succession   d’articles à dicaryon. Il existe  deux  types d’ article en alternance .

--une   ecidiospore.

--suivie par  un disjoncteur .

La libération des écidiospores se fait par gélification des cellules disjonctives.

Ces spores  sont des Ecidiospores   elles ont deux noyaux qui n ‘ont pas  fusionnés .

Elles vont être transportées par le vent ou les insectes   sur le second  hôte .Dans  ce  cas  il s’agit d un  genévrier  ( Juniperus communis   --famille des cupressacées ( Cupressaceae.)La deuxième  partie de l’évolution de la  rouille  va se réaliser avec  formation  des Téleutospores. ( Développement de protubérances orange.)
Dans  le cas de la rouille du poirier  le cycle  n’est pas complet. Comme  nous le dit Marcel Lecomte dans sa présentation  sur ce site -http://forum.MikrOscOpia.com/topic/1747-rouilles/?hl=poirier&do=findComment&comment=7699

Il n ‘existe pas de passage par l’urédospore ( ce que  l’on a rencontré  dans le cas de la  rouille du poireau )

Gymnosporangium sabinae  ref 2

1.     Règne : Fungi

2.     Embranchement : Basidiomycota

3.     Ordre : Uredinales

4.     Famille : Pucciniaceae

• Gymnosporangium fuscum de Candolle (Espèce CD_NOM = 512948)
• Puccinia juniperi Pers. ? (Espèce CD_NOM = 512949)
• Roestelia cancellata Rebentisch (Espèce CD_NOM = 512950)
• Tremella sabinae Dicks. (Espèce CD_NOM = 512951)

Conclusion

*********.

Avec  deux présentations   le cycle   de la  rouille   a été suivi  sur ses  5 étapes ( à  l’exception du stade  des  basidiospores.)

Le phénotype que  prend ce champignon a  chacune des étapes est très différent  ainsi 1 génotype  va  ainsi donner  naissance à 5 phénotypes.

Ce phénomène  est fréquent  surtout  parmi  les parasites  - La douve  du  foie par exemple  va changer d’hôte et  prendre des aspects phénotypiques  différents :

Œuf –miracidium –cercaire – metacercaire- distomule et enfin  douve .

Mais il  s’agit de métamorphose – Dans le cas de la rouille  chaque étape se termine  par la formation  d’une spore  -qui sera  soit  gamète – soir zygote  - soir dicaryon. Ce qui  rend   ce processus  de développement si étrange.

Par ailleurs :

Pour améliorer   les  images il serait nécessaire  de reprendre l’étude  de  la  rouille du poirier  chaque mois de mai en octobre  -  et non comme  dans le cas  présent   sur deux prélèvements en mai et   à l’automne – En particulier  cela permettrait une meilleure  étude des  pycnides  avec les  spermaties   et les trichogynes -   Donc  observation   à poursuivre  et à améliorer.

                                                                                Dominique

Ref :

1 http://www.amisdelaterre.be/IMG/pdf/2013_document_craw_rouille_grillagee_poirier.pdf  +++

Ref : 2

http://inpn.mnhn.fr/espece/cd_nom/461992/tab/taxo

d

En quelques  jours  les feuilles des poireaux  se sont couvertes de toutes petites tâches jaunes.    

La couverture rapidement  se  rompt .

Les sores contiennent une très  grande quantité de spores :

La taille  des spores  se situe autour de 27 µm . La couleur  est brun orange ou brun rougeâtre, elles sont échinulées  et . sphéroïdes.  .Ces  spores  contiennent  un pigment  jaune  de la famille des caroténoïdes  .Elles   sont    responsables  de la  très rapide dispersion de la maladie  - Immédiatement  issues  vers l’extérieur  elles  contaminent la plante  voisine.

Préparation  au bleu coton   :          

L image  suivante colorée au Bleu Coton   montre les  hyphes qui évoluent dans les  espaces  intercellulaire .

Quelques éléments microscopiques observés en fond clair, 40x, coloration congo ammoniacal :

Spore et baside floue

Deux basides

On voit qu'elles sont bisporiques (deux stérigmates)

Une hyphe très renflée du revêtement

Amicalement

Depuis quelques mois un nombre  de plus en plus important de patients  ne veulent plus  prendre  -   une famille de médicaments   appelés  statine ;- médicaments   qui leur sont  donnés   pour faire  baisser  le  cholestérol  afin de  prévenir les  maladies   vasculaires .

De plus en plus de personne  craignent les effets  secondaires qu’apporte  parfois ce  type de molécule .

Leur  préférence va désormais  aux   remèdes  à  base de plantes .

La médecine  chinoise  possède  depuis  très longtemps  un  médicament :

Le riz  rouge . Ce riz est rouge   en raison  de l’action  d une levure  monascus purpureus   sur le  riz .   

En France   dans le  commerce on  trouve :

La levure  rouge de riz .

La  levure de  riz  rouge .

La levure de  haricot  rouge .

 Qu’en  est il  de  ces produits    et   quel aspect  a cette levure au microscope ?

Pour en  savoir  plus   j 'ai acheté    3 produits .

De la  Levure de  haricot   rouge  en comprimés  et   deux  produits  vendus  comme  Levure  de  riz rouge en  gélules      (j’ai  abandonné les comprimés  à cause de la nécessité de  les  broyer) .

  Photo  du  contenu des cellules    sur  grossissement  40 :

  Le contenu au microscope   nous montre :

En A  une structure  très hétérogène  où les  particules  colorées sont peu  nombreuses .

En B   la lumière  polarisée   met en évidence  des  structures  cristallines abondantes.

En C  au X 800 ,les  zones  colorées sont  en fait  teintées  sans  structure de type  biologique  évidente .

En D                  il existe  quelques  rares  levures curieusement non colorées .

Il apparaît  donc que la couleur rouge du produit   ne vient pas d’ une accumulation de  levures   rouges  comme  on  aurait pu  s’ y attendre mais de la pigmentation de structure de  type   végétale  puisque   opaque à la lumière  polarisée  ( on les trouve en A  mais pas en B  ) .

La question  qui se pose  est  la suivante . Est on  en présence  de  riz  rouge  ou de riz  rougi ?

*Le Riz  rouge   est une  espèce   cultivée  en Camargue    - la couleur de ce  riz est en  rapport avec  la pigmentation de l’épicarpe   (partie  externe du péricarpe ( la peau du fruit) )

*Monascus  purpureus     est une levure qui  dans  certaines circonstances   -  va pouvoir  développer un pigment   qui va colorer l’organisme sur lequel  cette levure se  développe  et de ce fait  va  la rougir  (  le riz  le haricot  et autres ) .
 

On met  ainsi  le  doigt sur une imprécision :

Sur les photos  s’ il s ‘agit d’un  broya de  riz   rougi par une  levure le contenu  de la gélule devrait être  rouge  homogène  et le nombre  de levures non détruites  devrait être élevé ce qui n’est  pas le cas .

Pour aller plus  loin  dans  la compréhension de la  situation   j’ai fabriqué  divers milieux  de culture   :

Extrait de malt   + Agar .

Haricot + Agar .

Riz + Agar.

Banane  + Agar .

Flocon d’ avoine  + Agar .

      Avant d’ ensemencer  les milieux ,  le contenu de la gélule  est placé  dans un   milieu liquide :   Eau   +Saccharose 1%    placé  en étuve  à  30 °.

      Après  2 heures  on prélève  un peu de ce milieu   - On touche   simplement de dessus des milieux de culture .

    Les milieux de culture sont alors placés    à l’étuve à 30 °   pendant 3  jours.

   Résultat : milieu de culture à base de banane  (le meilleur résultat) :

    La croissance  des levures  s ‘est  faite  sans problème  à un point prés   : les levures ne sont pas  rouges !!!!

    L ‘aspect  microscopique    de la culture nous  montre :

Il semble exister plusieurs   types  de levures  (le contraste de phase perturbe  les couleurs  vraies  , mais en  fond  clair   il n’y  a   aucune  couleur. )

Donc  pas de levure rouge mais des levures  blanches :.

Il doit   donc  y avoir   une erreur dans la  manip  puisque sur la  boite  commerciale il est bien spécifié  la présence de Monascus  purpureus .

La réponse  est venue  de la consultation  du  site  du CNRS http://www.refdoc.fr/

L’article de Fernanda  sandra et col  parle de l’action   du  PH ( ref 1 ).

La production   du pigment se réaliserait mieux   sur un  milieu de culture  à Ph autour  de 5,5..

Un milieu liquide  est  donc refait :   il se compose   simplement  d’ eau   avec  1% de glucose   -Ph  porté à 5,5  par addition  progressive  de solution  d’ acide  lactique  à 10 %   (agitation constante –Ph  mètre en fonction ) ..

Le milieu  constitué est ensemencé  avec le contenu  d’une gélule. La préparation  est  placée en étuve  toujours  30 °pendant  2 jours.

Reprise de la  culture en milieu acide.

Résultat :

La synthèse d un pigment  rouge  s’est installée  en  48 heures   mais  pas avec toutes les  levures  présentes .

La préparation  contenue dans les gélules  contient   donc  la levure :

Monascus purpureus   - CQFD  -

Discussion

Cette gélule   est vendue dans un but  thérapeutique .

Elle  a  pour  élément   actif la  levure  - or on vient de le constater cette levure ne représente qu ‘une  partie infime de la préparation .

Monascus purpureus    est  une vraie usine chimique :

Divers  produits  ont été isolés

**Citrinine

( synthétisé  aussi   par aspergillus  penicillium et monascus )  a un effet néphrotoxique  (  un essai  de création de souche  de monascus  dépourvu de ce produit à  été  réalisé par génie génétique )  ( Ref 2 ).

**Pigment Azaphilone  ( rouge et jaune  ) Il a été mis  en évidence  5 autres  pigments  qui sont  responsable  ensemble de la couleur de la levure ( Ref 3 ) .

**Acide dimerumic

**Acide y-aminobutyric

**Phyosterols

**Isoflavone l

**Monacoline polyketide – (encore appelée  lovastatine  ( C24 H36O5 ) )

  Les statines  sont  les médicaments  les plus  efficaces contre le cholestérol . Ils sont produits dans la nature  par  un  certain  nombre levures  et de moisissures comme l’ aspergillus terreus    ou monascus  prupureus .

On y trouve  la  lovastatine , la  pravastatine, la mevastatine .

 C’est à cause de la présence de ce produit   que la levure rouge  à conquis  les marchés  ( mais  aussi  grâce  à  l’ ancienneté de son  utilisation   qui   nous vient de la médecine chinoise  mais dans  d’ autres  indications .)

Revenons à  notre observation :

Pour être actif  il est nécessaire d’ apporter chaque  jour  10 mg de Lovastatine  -  Sont  ils  contenus  dans  cette  gelule   ? C’est peu probable  vue la faible densité des levures .

. Une analyse faite aux États-Unis sur 12 suppléments de levure de riz rouge a révélé de très grandes variations d’ingrédients actifs, par exemple de 0,1mg à 10,09mg de monacoline K par capsule.

Ce qui fait penser que  la lovastatine , que  l’on sait extraire  depuis1987,  a été ajoutée   dans les  gelules  les plus dosées .

Comme il s’ agit  d’une  statine   ,-même naturelle ,  la   Lovastatine  a les  effets secondaires des   autres  statines   .
La revue de pharmacologie  Prescrire  a  notifié  des effets  secondaires  sérieux à la suite  de la consommation de levure de riz rouge  entre autres  une  rhabdomyolyse  ( atteinte musculaire ) Ref 4.

En conclusion  : prend de la  levure  rouge  de riz  ou  de riz  rouge ce qui  est la même chose sur le plan commercial et oculaire( mais pas selon  le point de vue du microscopiste  ) correspond

--Soit  à ne pas prendre  la quantité  efficace  de statine .

--Soit à courir  les mêmes  effets  secondaires que les  produits  commercialisés   sous le nom de   statines  ( sinvastatin  - atorvastatine  etc. ).

Références

Ref 1

http://www.refdoc.fr/Detailnotice?idarticle=630262

http://www.refdoc.fr/Detailnotice?idarticle=14984979

Ref 2

http://www.refdoc.fr/Detailnotice?idarticle=8419067

Ref 3

http://www.refdoc.fr/Detailnotice?idarticle=6616772

Ref 4

La revue du  praticien  septembre 2007 T 27 N° 287 P 675

                                               Dominique

Ces fungi sont aquatiques et saprophytes ou parasites. Ils se caractérisent par la production de spores flagellés (zoospores) au sein d'un sporange. Le thalle apparait comme un mycelium rhizoïde se développant à l'intérieur de la cellule parasitée – il est dit alors « endobiotique ». La paroi cellulaire est chitineuse, et le mycélium ne possède pas de cloison – septum - séparant les cellules . Le sporange est une capsule pouvant être endobiotique ou épibiotique, se situant dans ce dernier cas à l'extérieur de la cellule parasitée.

Le chytride qui nous occupe fait partie de l'ordre des rhizophydiales. Cet ordre comporte dix familles et 14 genres. Le espèces du genre rhizophydium sont eucarpique (c'est à dire ayant un thalle possédant des organes reproducteurs) et monocentriques. Le sporange est épibiotique. Les spores ne sont pas séparés par des loges séparées et le sporange n'a pas d'opercule, mais un ou des pores laisse libérer les sporozoides à maturité. Les rhizoides partent d'un seul point du sporange, ils sont endobiotiques, et se développent donc à l'intérieur de la cellule parasitée.

Le cycle de reproduction de Rhizophydium sp. comporte une phase asexuée et une phase sexuée.

Le sporange parasite est produit des spores haploïdes qui peuvent soit réinfecter d'autres cellules et donner des sporanges, soit générer des gamétanges males ou femelles. Les gamétanges qui se présente comme une sphérule épibiotiques (avec rhizoides endobiotiques) fusionnent et donnent un spore de latence, qui engendre un zygote de latence, donnant lui-meme des zoospores qui produisent des rhizoides, entamant un nouvelle phase végétative

La détermination classique des rhizophidium, au niveau de l'espèce, repose sur l'examen morphologique des sporanges et des rhizoïdes mais cette procédure est rendue caduque par le développement de la microscopie électronique et des analyses moléculaires. C'est à partir de l'ultrastructure des sporozoides que l'on détermine actuellement l'espèce.

Sur le net on trouve encore des sites et une littérature utile :

sur archive.org (chercher à "phycomycètes"), on peut lire ou télécharger l'ouvrage classique de Sparrow :

• 
   
  
• Sparrow FK.. Aquatic Phycomycetes. 2nd revised edition. Ann Arbor, MI. University of Michigan Press, 1960
  

et un ouvrage d'introduction plus ancien mais utile pour comprendre les phycomycètes :

• 
   
  
• Fitzpatrick, Harry Morton.The lower fungi Phycomycetes, New York : McGraw Hill, 1930
  

mis à part les articles de wikipedia ( chytridiomycota ) on pourra consulter ce site web :

• 
   
  
• Chytrid fungi on line : http://bama.ua.edu/~nsfpeet/ où l'on trouve une clé interactive de détermination des chytrides et, notamment, des rhizophydium.
  

J'ai observé cet organisme fixé sur des Nitzschia. Plusieurs autres observations ont été publiées auparavant sur MikrOscOpia par D. Voisin ( voir : http://forum.MikrOscOpia.com/index.php?showtopic=2172, et http://forum.MikrOscOpia.com/index.php?showtopic=1451 ), et la discussion autour de ces observations avait permis d'orienter la détermination vers les phycomycètes et les Chytrides en particulier.

photos :

voici quelques prises de vue au grossissement obj. 100x immersion

1. le sporange est ovoïde ou obovoide et sessile, sur un substrat (en l'occurrence le frustule du Nitzschia). On discerne une masse granuleuse ici peu différenciée

2. sur ce specimen, on discerne les mycorhizoïdes pénétrant dans le frustule. Ils semblent ramifiés, même s'il y a un tronc plus épais. Les sporozoides apparaissent comme des sphérules verdâtres

3. le sporange est vide, on remarque une large ouverture sur le pole apical. Je ne sais trop si les sporozoides s'échappent par un pore ou si c'est une partie supérieure du sporange qui devient déliquescent, libérant une masse de spores.

des individus à d'autres stades de croissance ou de reproduction n'ont pas été observés, de même que la libération des sporozoides. Le fait que le rhizophydium parasite Nitzschia pourrait faire penser à R. Clinopus, mais ce dernier est décrit comme possédant des rhizoïdes non ramifiés et les sporanges sont plus larges que long, ce qui n'est pas le cas ici. Il est à noter que la morphologie du thalle d'un rhizophydium peut varier selon l'âge.

La thalle est caractéristique de l'espèce. Il se présente en deux parties : un périthécium femelle, asque produisant des ascospores, et un appendice male, comportant l'anthéridie

ici quelques Pericethium - obj 20x : noter la structure de la zone apicale. elle comporte deux appendices sensibles qui jouent un rôle dans l'ouverture de l'asque, libérant les spores.

Détail de l'anthéridie (mâle) : quatre ou cinq cellules se prolongent par un appendice. Le tout repose sur des cellules basales.

les spores de Hesperomyces virescens sont allongés et comportent deux cellules. - obj 20x :

Les Laboulbeniales sont assez bien documentés sur le web. On peut citer cette étude sur la prévalence de H. virescens (doc pdf en anglais) sur les coccinelles (aux USA). Cet article comporte quelques illustrations au MEB intéressantes.

Ici le lien vers une illustration MEB de la zone apicale de Hesperomyces virescens : Hesperomyces virescens - zone apicale

Les observations ont été faites en milieu aqueux, je n'ai pas de fixateur de Carnoy (renseigné sur le forum par Claude Calice en 2005, j'espère qu'il nous lit toujours)

ps : je dois à un participant du forum "le monde des insectes" l'identification du parasite décrit et de son hôte. Voir la discussion ici

cordialement,

Patrice

Voici des éléments fertiles qu'on appelle des basidiospores.

Voici une photo d'une des maladies de l'olivier: l'œil de paon qui est un champignon qui contamine la feuille de l'olivier et peut faire des ravages importants si il n'est pas traité et compromettre la récolte.

Elle est le résultat de l'empilement de 10 images avec Hélicon Focus.

Cordialement

Claude

Il s’agit de Phaeomarasmius erinaceus. Il présente chapeau méchuleux ,hérissé ainsi que son pied sur la partie inférieure.

Le revêtement du chapeau est formé d’hyphes longuement articulées à parois épaisses avec des incrustations de granulations pigmentées. Les parois sont bouclées. Les spores sont lisses ,brun rouillées.

 

 

 

 

Stemonitis smithii

Photo à la bino

et au micro pour les spores.

J'adresse toutes mes félicitations à Daniel qui nous a concocté un remarquable article sur les Oïdiums. Il me touche vraiment car c'est un ordre que j'étudie tout particulièrement, depuis quelque temps.

Pour tout passionné de microscopie, la réalisation de préparations de cléistothèces constitue un régal car les ramifications des fulcres sont spectaculaires chez certaines espèces (elles constituent d'ailleurs la base des clés de détermination).

Bonne journée

M :)

en annexe,

Ce sont des spores de conservation de certains champignons, souvent munies d'une paroi épaisse qui leur permet de subsister d'une année sur l'autre dans le sol ou les débris végétaux en décomposition, et qui ne naissent pas sur des basides.

M ;)

Détails techniques :

coloration au bleu coton lactique

montage au glycérol

objectif Leitz plan apo 63x/1,40 à immersion

APN Coolpix 995

Voici toujours des téléutospores (stade III - cela va demander des explications qui vous seront bientôt fournies si vous le souhaitez), observées cette fois sur la rose trémière (Althaea rosea), si chère à nos amateurs de grains de pollen géants !

Il s'agit de Puccinia malvacearum Mont.

Afin de pouvoir exploiter mes modestes connaissances botaniques générées il y a longtemps par une spécialisation en Coléoptères CURCULIONIDAE (où chaque espèce est en principe inféodée à une plante bien précise....), je me suis mis à étudier les UREDINALES (Rouilles) qui sont des champignons Basidiomycètes particulièrEment intéressants sur le pLan microscopique.

Voici, comme première approche, une image d'une téleutospore de la rouille du framboisier, qui va illustrer à merveille cette déclaration.

Après une longue période de travail assidu et épuisant, qui ne m'a laissé aucune place pour des loisirs, sinon très ponctuels, je vais mettre un point d'honneur à tenter de susciter à nouveau votre intérêt pour la microscopie appliquée à la mycologie, et d'apporter une réponse, dans la mesure de mes compétences, à toute question qui sera posée !

Claude LEJEUNE est malheureusement dans la même situation que moi sur le plan professionnel, et il est désolé de ne pas être présent plus souvent !

Je pense très sérieusement à une retraite anticipée qui me permettrait enfin de ne plus devoir juguler ma passion.....

Au plaisir de vous lire

M :)

L'astrée hygrométrique (Gastérales) est un champignons présentant un "exopéridium" éclaté en 6 à 10 branches.Celles ci ,sont enroulées autour de la gléba(poche contenant les spores) par temps sec ,et étalée radialement par l'humidité.

Ce spécimen a été trouvé dans un bois clair .

Je pense le garder comme indicateur d'humidité dans la pièce où se trouve mes microscopes ;)

Les spores de l'astrée sont arrondis,brunâtres et présentent des ornementations verruqueuses plus ou moins allongées sur leur surface .

Certains grains présentent un pores...Mais les spores de champignons ont ils des pores?

Ils mesurent entre 6 et 10µ

x63 imm x100 imm coolpix4500 photoshop neatimage

Trouvé sur une bouse de vache dans un pré ce champignon à lamelles possède des spores noires ovoïdes avec une bordure plus claire et un pore à une extrémité

Les spores mesurent env.de 7.5à 10µ/12.5à17.5µ

x100

coolpix 4500

Avec le redoux réapparaissent les premiers champignons à lame.

La Collybie des cônes (ici, plus précisément Strobilurus tenacellus) fait partie au printemps de leurs plus gracieux représentants . Elle vient sur cônes enfouis de Pin. On trouvera sa soeur, la Collybie commestible, Strobilurus esculentus (1), sur cônes d'épicéa. Deux autres "collybies" des cônes (2) existent encore, qu'on ne différentie avec certitude que sur leurs critères microscopiques.

Fouinez sous les résineux : vous ne manquerez pas de la trouver. Et profitez-en, si le coeur vous en dit, pour la passer au micro. Ses lames s'ornent de grandes et très frappantes cellules en cigare, des cystides (cellules stériles) comme vous les verrez dans le second message.

Leurs parois sont épaissies, réfringeantes dans l'amoniaque et leur extrémité est souvent ornée d'un capuchon de cristaux. (On ne le voit pas sur ces photos : l'amoniqaque justement les a dissout).

C'est en outre facile à observer - et permet de s'initier à l'examen microscopique des champignons à lames.

(1) Commestible ? Peut-être ! :o mais sa taille n'invite guère à la récolte. Ce nom lui vient sans doute, comparativement, de la légère âpretée de son sosie, la collybie ici même représentée.

2. Collybie reste l'appelation vernaculaire courante mais le genre a déménagé et s'est mué en "Strobile" depuis une trentaine d'années, sur la foi de nombreuses particularités micromorphologiques.

Ce qu'on peut voir

Comment on fait ?

Facile.

1. Prélever une lame du champignon avec une pincette.

2. La déposer sur sa lame de verre et y faire une serie des coupes transversales aussi fine que possible (disons 0,1-0,2 mm, ce ne sera déjà pas mal et ça se fait facilement à main levée avec un rasoir et les doigts dans le nez sous une bino).

3. Ne conserver que trois ou quatre coupes (les plus fines - celles qui ont l'air raté ou à peine visible).

4. Mettre une goutte de colorant (congo, cresyl, ou tout autre ; acqueux ou amoniacal pour le congo - acqueux ou alocolique pour le crésyl).

4. Recouvrir. Presser délicatement mais fermement avec une l'embout gomme de votre crayon par exemple (en sorte d'écraser votre prépartion).

5. Observer (x 100 pour repérer, x 400 ou plus - 100 et immersion) pour détailler.

Cette methode vaut pour l'observation des surfaces fertiles de tous les champignons à lames.

On peut aussi (et parfois : avantageusement) n'effranger que l'arrête de la lame du champignon.

Au rasoir, en détacher son "filet" extérieur.

Les cystides y sont fréquemment d'un autre type que celle des faces - et plus spectaculaires.

(Cela va dépendre du genre observé).

Amicalement,

Claude

Commençons par jeter un coup d'oeil à la bête ; désolé si sa mystérieuse splendeur vous laisse de marbre : il y en aura de plus flatteuses... Il s'agissait d'un apport ayant voyagé 24 heures quand je l'ai photographié.

Il ne s'agit pas là de prétendre vous initier à la détermination d'une russule (encore que ce ne soit pas nécessairement aussi compliqué qu'on le dit) mais, comme annoncé en introduction (c'est à dire tout en bas) de profiter de l'occasion pour mettre deux ou trois photos micro en lignes.

Outre les informations (nombreuses) qu'ils nous livrent quand on les examine sous toutes leurs coutures : macroscopiques, écologiques et organoleptiques (saveur et odeur), la vraie traque, quand on a un doute sur un champignon, commence sous le microscope.

Et, les spores mises à part (nous y reviendrons plus tard), les éléments les plus riches en informations pour les russules "habitent" souvent dans la cuticule (la pellicule qui recouvre leur chapeau). Sous la forme des cellules différentiées (ou non) qui les composent.

Ici : à gauche, deux "poils". Ce sont les éléments les plus banaux, présents dans toutes cuticules. On notera par exemple qu'ils sont, dans ce cas, dotés de terminaisons plus ou moins capités, en tout cas nettement renflées. C’est un indice.

A droite : ce que l'on appelle des "hyphes primordiales incrustées". Ce sont des articles beaucoup moins fréquents, présents chez certaines russules uniquement. C’est un indice plus fort encore.

Leur particularité : ces hyphes (hyphes = cellules) pluricloisonnées exsudent un suc incolore qui cependant fixe la Fuchsine basique et résiste ensuite temporairement (quelques minutes) à une décoloration par l'acide chlorhydrique faiblement dilué (3-4 %). On parle de décoloration différentielle.

En insert, l'une de ces hyphes primordiales, débarrassée de sa gangue et des ses exsudats mais laissant néanmoins apercevoir, au sein de sa cellule terminale, un amas granuleux qui peut aussi (mais ce n’est pas suffisant) signer sa vraie nature. Un résidu, en quelque sorte…

Bonsoir Claude

A part la fuchsine,as tu utilisé des filtres de Rheinberg pour obtenir ces contours colorés à bon escientet particulièrement esthétiques? Ou bien est- ce dû au DIC ?

Pour avoir des (d'autres) indications, ou des réponses aux questions innombrables que tu peux te poser face à la mycologie microscopique (et à la mycologie tout court d'ailleurs) n'hésite surtout pas à poser des questions ! L'occasion fait le larron. Je parle pour moi bien sûr, trop souvent et trop longtemps silencieux sur ce forum. "Action - Réaction" comme disait l'autre : si tu demandes, je réponds !!

...les deux mon capitaine ! Voire les trois. Je m'explique :

Les seules photos faites en DIC, c'est :

- le "poil" supérieur gauche (*) (Fuchsine et contraste interférentiel) ;

- et l'incruste du milieu. C'est à dire l'"Hyphe primordiale" dénudée (débarassée de sa gangue) mais avec son contenu résiduel granuleux. Montage sans fuchsine mais dans du Rouge Congo amoniacal au contraire ; "au contraire" car l'amoniaque, comme tout autre alcali, a pour propriété de dissoudre l'exsudat incolore évoqué. Par contre il met bien en relief les parois. Un coup de "niveaux automatiques" plus tard sous Photoshop et on obtient par bonheur cette accentuation effectivement bienvenue quoique partiellement involontaire.

Pour la photo des deux HP de droite ("rouge et noire") : bain préalable de 10 minutes dans de la Fuchsine phéniquée ; rinçage d'une trentaine de secondes à l'acide chloridrique à 4-5 %, observation dans le même milieu mais à 1 % environ.

C'est précisément cette technique de coloration et elle seule (ou presque) qui permet de mettre en évidence cette gangue ruguleuse autrement invisible et qui "signe" l'Hyphe primordiale et permet donc de la diagnostiquer avec certitude.

Et c'est cette méthode que j'évoquais en parlant de "décoloration différentielle". L'HCL dissoud rapidement la coloration rouge communiquée aux divers tissus par la Fuchsine, à l'exception notoire et exclusive (ou presque : gare aux artefacts !) de la coloration pourpre vineuse prise par l'exsudat des HP qui seule y résite plus longtemps. Photo sans filtre. Accentuation des contrastes sous Photoshop.

J'ai bien sûr choisi une russule où je savais cette réaction flagrante, même sur exsiccatum (c'est le cas ici). Il y a malheureusement bien des cas où le résultat est d'interprétation plus délicate, même sur le frais. Et comme d'baitude : ce sont les plus nombreux !

Bien à vous deux,

(et aux autres !)

Claude

PS

Noter au passage que cette technique n'a vu le jour que vers la fin des années 20, mise au point par le premier grand russulologue "moderne" (Vaclav MELZER) à qui l'on doit aussi l'invention du réactif qui porte son nom et permet de colorer en gris-noirâtre les ornements (dits amyloïdes) des spores de russules.

Au paravant toutes les spores, évidemment hyalines (= incolores) sous le microscopes, étaient uniformément décrites comme "échinulées" point barre. Quand on sait que seul le dessin de leur ornementation permet parfois de différentier avec certitude deux russules assez proches, on imagine le souk qui règne encore dans "les noms anciens" des pères fondateurs de la mycologie. Et malgré des oeuvres titanesques plus récentes (1950 ; 1985 ; 1998 pour ne citer que quelques jalons de l'histoire de la "russulologie") et tout l'arsenal micro et macrochimique d'aujourd'hui, des interprétations polémiques sur tel ou tel taxon continuent de faire rage parmi nous ! :lol:

(*) Des fois, en se relisant, on se demande la tronche que ferait un quidam en lisant des morceaux de nos phrases. Ben mon Cher, ces gens-là, ils sont capables de disserter jusqu'à point d'heure sur "le poil supérieur gauche". Y a du vrai, remarquez, y a du vrai...

... et avec un montage photo, c'est plus digeste ?! ;)

******** INDEX DU FORUM ********

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Disposant de quelques jours de congé, je vous adresse quelques photos tirées de ma collection de préparations définitives !

Voici ce qu'on appelle des chlamydospores, qui sont des éléments de reproduction non sexués.

On les trouve notamment chez certains champignons (du genre Nyctalis) parasites d'autres champignons (du genre Russula par exemple).

Bonne nuit

M ;)

Avec mon ami et co-modérateur Claude LEJEUNE, nous tenterons plus que jamais de vous communiquer notre passion.

Voici en annexe une image des macrocystides de Strobilurus tenacellus : elles se trouvent sur l'arête des lames ! Cette image a été réalisée en lumière COL x60.

Bonne nuit à toutes et tous ... et attention si vous prenez la route !

Amitiés

M ;)

Je n'avais pas pensé aux corticiacées, comment fait-on pour prélever, on gratte? On décolle? On prélève avec le substrat?

Cher Bret,

Cher Tous,

Les Corticiacées compensent l'archaïsme de leur morphologie et leurs modestes atours (c'est un euphémisme) par la beauté plastique de certaines de leurs cellules, à l’origine d’authentiques coups de foudres mycologiques et micrographiques : ces champignons scellent indiscutablement ces deux passions.

C'est sur la face inférieure du bois mort que tu feras les plus belles récoltes. Il suffit en général de "s'attabler" à un vieux tas de bois et de le démonter en inspectant méthodiquement les morceaux : les branches du dessous, et notamment celles qui sont restées au contact du sol (humidité préservée), sont les plus riches en croûtes.

Tu récoltes au couteau ou à la serpette avec une tranche de substrat (en général, écorce ou bois à nu : attention, on se blesse facilement !) ; tu transportes tes spécimens dans du papier journal pour éviter une trop brutale déshydratation, et face inférieure maintenue dans sa position originelle (1).

Ensuite tu réhydrates éventuellement (en imprégnant d'eau ton papier journal, par exemple, et en laissant ta croûte y séjourner un quart d’heure) puis :

- tu grattes, s'il s'agit d’un Corticié pelliculaire, "crémeux" ou très finement membraneux ;

- tu fais une très fine coupe plus ou moins radiale si ta croûte est plus épaisse ;

- tu colores : rouge congo amoniacal, ou mieux : KOH (ou soude domestique) à environ 5% + rouge Phloxine B ; ou, encore mieux : les deux, successivement (2) ;

- tu recouvres d'une lamelle, tu écrases à la fois délicatement et fermement ta préparation (p. ex. avec l'emboût gomme d'un crayon) et observes à x 400 au minimum puis tu détailles en immersion.

Les corticiés ou croûtes "résupinées" (= totalement étalées sur leur support et donc privées de "chapeau" et de pied) ont une structure simple : une assise externe de cellules allongées dans le sens du support, qui se redressent progressivement et dans le prolongement desquelles s'épanouissent les basides et différents types de cystides (éléments stérils entre les basides, ou immerses, dans la trame même de la croûte). Ce sont ces cystides qui peuvent être étonnamment belles : couvertes de cristaux, encapuchonnées de gros globules, gavées de sucs qui noirciront ou bleuiront dans certains réactifs, etc.

D'autres corticiés ont évolué vers une plus grande différenciation : amorce de "chapeau" (un bout plus ou moins grand de la croute se détache légèrement du substrat) : on dit alors qu'ils sont "étalés-réfléchis".

Ils sont primitifs, certes, mais leur rôle écologique est important (vital même !): ils sont les tout premier à s'attaquer au bois mort, à le décortiquer et (ou) à préparer l'arrivée des autres champignons "lignivores" qui, tous armés de puissants enzymes, vont réaliser cette "extraordinaire performance biochimique" (l'expression n'est pas de moi : suis hélas nul en chimie...) qui consiste à décomposer la cellulose et la lignine et, partant, à recycler le carbonne.

Ci-joint deux représentations "idéales" de ce qu'on peut voir (dessins repiqués, pour leurs vertus pédagogiques, dans des monographies citées en Légende).

Envoie-nous des photos en cas de problèmes (dont des photos macro de tes récoltes), j'essayerai de te guider (toi, ou quiconque voudra t'accompagner virtuellement dans cette chasse à la croûte !).

Amicalement,

Claude

Notes

1. Les croûtes abandonnées un jour ou une après-midi, dans une boîte humide, continuent de se développer. Leur cellules, partiquement réduites à leur "hyménium" (= leur surface fertile, l'usine à spores en quelque sorte) continue de croître, en respectant son géotropisme. Les cellules d’une croûte séjournant à l'envers s'enchevêtreront donc cul par dessus tête…

2. En mycologie le rouge congo est un colorant pariétal (les parois des cellules – hyphes - sont essentiellement composées de chitine). La Phloxine B quant à elle colore le cytoplasme. Mais ce n’est jamais que de la cuisine : tu peux aussi tester d’autres colorants ! La présence d’un alcali aide à regonfler et à dissocier les structures.

3. Corticiacées (famille) et Corticiés (tribu) sont bien sûr employés ici dans un sens très larges (tout ce qui à l’apparence d’une croûte est loin d’être un Corticium (4) ou même une Corticiacée ; tu risques de tomber sur des Ordres ou sous Ordres (5), voire des Classes (6), différents. Les basidiomycètes ne sont pas les seuls à avoir développé cette stratégie élémentaire (un organisme pour ainsi dire réduit à sa fonction reproductive). Mais ne compliquons pas : l’essentiel pour l'instant est de commencer par « voir » quelque chose.

4. Il n’existe pratiquement plus que deux ou trois Corticium « vrais » : les autres ont été pulvérisés dans maints nouveaux genres.

5. Par exemple les phragmobasidiomycètes ou encore hétérobasidiosmycètes (à baside compartimentées) ou : 6. ... des Ascomycètes.

7. …il n’y a pas de 7.

Légende

Planches (figurant la structure d’une croûte et certaines de ses cellules) extraites de 1990, Hjorstam K. & L. Ryvarden : « Lopharia and Pododostereum » et 1997, Nunez M. & L. Ryvarden : « The genus Aleurodiscus » (Synopsis Fungorum, T. 4 et 12 – Fungiflora – Oslo).

Amicalement

Claude

Bonjour Bret,

Bonjour à tous,

(…) j’ai vu aujourd’hui, sur une souche, des polypores versicolores (Trametes versicolor) que je vais me faire une joie d’observer (…)

Il y a encore moyen de trouver des champignons charnus : sur les souches (ou sur tronc vivant) de frênes, de saules ou de peupliers, dans les forêts riveraines, pousse l'hivernale Collybie à pied de velours (Flammulina velutipes) ; et ici et là, en bordure de chemin, sur brindilles enterrées, parmi les feuilles, vient la Tubaire d'Hiver (Tubaria hiemalis).

En fouillant bien, on peut trouver des champignons à lames presque toute l'année.

Sans parler des "croûtes" (les Corticiacées), qui sont un pur bonheur pour le microscopiste.

Mais c'est une autre histoire, dont je vous entretiendrai prochainement, lors de l'initiation méthodique promise.

Claude

NB : indépendamment des deux espèces citées, c'est dans les épaisses litières d'aiguilles des forêts de conifère (épicéas de plaine par notamment), relativement protégées du gel, qu'on trouvera, le plus facilement, les champignons de l'arrière automne. Pensez à faire des exsiccata (= à dessécher des spécimens, pour étude ultérieure).

Photo :

= Marcel Leconte Je reviens avec un peu de retard sur ce sujet !

Merci Claude (et amitiés en passant...) d'avoir clairement situé la microscopie des Polypores car c'est effectivement du travail de spécialiste et de technicien maîtrisant tous les tours de main ....

M :)

Salut Marcel,

(& le bonjour à tous)

Ta question : Existe-il des réactifs mettant en évidence au microscope la localisation de toxines? Je n'en ai jamais entendu parler ...

D'ailleurs et en passant, les champignons contiennent, ou sont susceptibles de contenir (pollution donc métaux lourds) une foule de saloperies !

les lames d'Amanita phalloides deviennent mauve violet sous l'action de l'acide sulfurique

Cher Marcel, le jour ou les morfalous qui sont "en mesure" aujourd'hui de confondre (par exemple) une coulemmelle et une amanite phalloïde, battront librement les bois avec un flacon d'acide sulfurique dans leur poche, c'est nous (et nos Zamis les Mycètes !) qui aurons tout lieu de "baliser"... :blink:

Amitiés,

Claude

PS

"La (re)connaissance des champignons à travers leurs seuls caractères botaniques est le seul moyen sûr de ne pas s'empoisonner" (Jenesai P. Luqui ; mais je sais que tu seras d'accord !). Comme il n'y a qu'une petite quinzaine de champignons mortels pour plus d'un bon millier de commestibles avérés (je n'ai pas dit "savoureux" ; et encore moins d'une totale inoccuité), c'est par la connaissance botanique et macroscopique (...qui ne pose aucun problème sérieux) de ces "tueurs systématiques" qu'il faut commencer.

La réaction amyloïde est très évidente (coloration des sucres complexes qui composent les crêtes ornementales des spores en violet noirâtre).

Ici, chez Lactarius evosmus !

Ces spores sont toujours de l'ordre de 6-8 x 4-6 µm, ce qui nécessite l'emploi permanent de l'objectif x 100 à immersion !

Cher Frédéric,

Je ne peux que t'encourager dans le chemin choisi !

Quelques précisions afin de t'aider ....

Clitocybe nébuleux : ton identification, d'après ta photo, semble être valable ! en outre, c'est la saison ....ajoutons à cela qu'il pousse fréquemment en troupes nombreuses ; je l'observe très souvent en pessière, en Belgique, mais il se trouve aussi sous feuillus (on le qualifie d'ubiquiste) ; il est assez remarquable par son chapeau dégradé de gris jaunâtre clair , mais le caractère déterminant est pour moi son odeur très particulière et caractéristique qui permet de le reconnaître à tous les coups.

Je ne me donne pas le droit de donner un avis quant à la qualité de tes images, mais j'ai du mal à reconnaître les éléments que tu cites.

Pour la mise en évidence des basides, je te recommande l'utilisation du rouge Congo SDS sur du matériel frais ou du rouge Congo ammoniacal sur un exsiccatum. Je vais tenter de trouver un C. nébuleux afin de t'envoyer l'une ou l'autre image de ce que tu veux observer.

Pour les basides, travailler au moins à x40 et pour les spores à x60 ou x100 (elles sont elliptiques, jaunâtres, et font 7 x 4 µm).

Bravo pour ta démarche et tes expériences et au plaisir de te lire !

Une dernière précision pratique : pour bien observer les basides et cystides en mycologie, je pense que la meilleure des techniques consiste à pratiquer une dissociation !

Prélever un minuscule fragment de lame ; le colorer au RCongo durant quelques secondes, éliminer le surplus de colorant avec un papier genre Sopalin, bien rincer, éliminer à nouveau le surplus d'eau, puis poser une nouvelle goutte d'eau ;

poser la lame CObjet puis écraser délicatement avec une gomme un bout de bois ou de PVC.

Pour améliorer la qualité de l'observation, on peut utiliser du chloral lactophénol ou du glycérol qui ont un indice de réfraction nettement supérieur.

Bonne continuation et fais-nous profiter de tes expériences !

M :)

Bonjour Bret,

Bonjour à tous,

 

...on ne peut rien voir des éléments que tu recherches en épiscopie, cher Bret ! d'où la perlexité de Marcel qui n'avait pas dû relever ta remarque.

Toutes les observations en mycologie se font en diascopie.

 

Amicalement,

Claude

Merci pour ta remarque Claude, et surtout d'avoir rectifié ! dans ma précipitation, cet élément dans la réponse m'avait échappé !

Voici une série d'images réalisées en vitesse à l'intention de Frédéric !

L'image précédente était réalisée avec l'objectif x 60 ; voici mintenant une image à l'immersion !

La chair des Clitocybes se déchire ; elle ne casse pas comme celle des Russulacées : c'est dû à la présence d'hyphes entrelacées !

Observons maintenant l'arête d'une lame, ou l'on voit très bien basides et cystides !

Petit morceau prélevé avec soin, coloré légèrement au rouge Congo SDS et observé dans l'eau !

L'élément déterminant chez les Basidiomycètes : la baside, sur laquelle naissent un nombre variable de stérigmates (filaments qui portent les spores) ; ils sont souvent au nombre de 4 ; on parle alors de basides tétrasporiques !

ATTENTION : il est très difficile d'observer les 4 stérigmates à la fois par manque de profondeur de champ ! faire varier la mise au point .....

Un autre élément qu'on rencontre en très grand nombre sur l'hyménium d'un Basidiomycète : la Cystide !

Souvent, on peut la confondre avec des basidioles, qui sont des basides en formation. Une astuce pour les reconnaître consiste à pratiquer une double coloration à la Phloxine B alcoolique et au rouge Congo SDS ; les éléments matures vont se colorer en rouge et les éléments immatures se colorent en violet rose.

Voilà Frédéric,

Je termine par la photo d'une dissociation, obtenue par écrasement d'une minuscule parcelle de lame (tapoter avec une gomme ou un bout de PVC sur la lame couvre-objet, jusqu'à ce que les éléments se séparent de manière visible).

Il est plus facile ainsi d'observer et de mesurer basides, cystides et basidioles, car elles s'écartent les unes des autres ...

La qualité des images n'est pas spécialement bonne, mais j'ai dû oeuvrer en vitesse (boulot oblige). Cependant, je tenais à honorer ma promesse de tenter de t'aider ! J'espère que cela te servira de point de départ à de futures photos que tu partageras avec nous !

Voici en dernier lieu une image un peu plus nette et plus spectaculaire de basides chez Lactarius flexuosus ! On voit très nettement les 4 stérigmates sur l'une d'entre elles ....

A propos de Clitocybe nebularis, je vous soumets ces quelques lignes du Docteur L. GIACOMONI, mycologue toxicologue, parues aujourd'hui sur le forum Mycologie Europaeae :

""""" xxxx me demande un avis sur un article publié dans la revue "xxxxxxxx" par un mycologue dont la spécialité n'est pas la toxicologie (et qui n'est d'ailleurs pas médecin). Ce article apprend au mycophage moyen que Lepista nebularis est un champignon comestible, très recherché dans certaines régions (on ne le sait que trop !). Mais on sait aussi qu'il frappe parfois de façon erratique. Il est trop facile de parler d'allergies, alors que certaines substances toxiques ont été identifiées chez ce champignon, dont la nébularine qui inhibe la croissance des fibroblates et des cellules épithéliales (Loefgren, 1953, Gubta et Bakumi, 1982), et des composés polyacétyléniques comme la diatrétyne. Ce champignon est également avide de métaux lourds (Quinche, Wennig). La fréquentation de mycotoxicologues étrangers dans les congrès internationaux nous confirme qu'il est en ligne de mire des spécialistes, notamment en Italie. On connaît les efforts que nous avons déployé en France comme en Italie pour que les consommateurs soient informés de la toxicité potentielle ce champignon (...et de quelques autres)... même s'il est bien toléré par certains. Et comment peut-on consommer cette chose nauséeuse et malodorante alors qu'il existe pour les amateurs des cèpes, des chanterelles, et bien d'autres ? """"""""""

Cette mise en garde est importante, car la dégustation de champignons doit rester une partie de plaisir, non une partie de roulette russe .... Pour votre information, on vient encore de nous signaler 3 décès en France durant ces derniers jours suite à l'ingestion de champignons dangereux ou mortels, par confusion de détermination.

M :unsure:

Pour votre information, j'ai oublié de préciser que deux des personnes décédées ont confondu des Coulemelles (Lépiote élevée = Macrolepiota procera) avec de grandes Amanites phalloïdes .....

Cueillir des champignons en n'étant pas capable de différencier ces deux espèces relève du suicide pur et simple !

Alors, si vous avez des pulsations mycophages : PRUDENCE ! Il existe des champignons qui sont excellents au goût MAIS qu'on ne mange qu'UNE SEULE FOIS !

M :angry:

Bien chers tous,

Je vais clore provisoirement ce chapitre "comestibilité" car j'ai peur de déborder du cadre de notre forum "Microscopie" et de me faire admonester par notre modérateur !

Voici donc une petite synthèse de ce que je pense à ce sujet, et qui rejoint tout-à-fait les considérations de Claude :

1/ manger des champignons implique impérativement la connaissance PARFAITE et la reconnaissance SANS AUCUN DOUTE des espèces mortelles de nos régions ! (...10 à 15 espèces)

2/ Poser une considération négative à propos de la comestibilité douteuse d'un champignon représente toujours un exercice périlleux car c'est la meilleure manière de se faire des ennemis à n'en plus finir, surtout en France où la mycophagie est le résultat de la pratique d'une cueillette ancestrale ! .... et je ne tiens pas à gérer un carnet d'adresses où domineraient des ennemis !

Il suffit de voir ce qui se passe actuellement avec le bidaou, le nébuleux, ... etc ...

3/ Les champignons, même les meilleurs comestibles, sont les indicateurs de pollution par excellence de la nature : ils fixent les métaux lourds (plomb, cadmium, mercure, césium), la radioactivité, les pesticides, les insecticides, les herbicides, et autres déchets toxiques de l'activité humaine. Des effets néfastes se manifesteront vraisemblablement par accumulation, à longue échéance .... Imaginez alors ce que représente l'ingestion de Cèpes de Bordeaux (4 fourchettes dans les guides pour mycophages) cueillis dans un bois situé en bordure d'autoroute....

4/ Notre organisme n'est pas "conçu" pour dégrader les sucres complexes (chitine) qui constituent la matière solide du champignon : il faudrait un estomac de ruminant pour y arriver ! Il arrive chaque année d'ailleurs qu'on doive ipratiquer en urgence une opération chirurgicale chez des personnes âgées pour des occlusions intestinales provoquées par des champignons non suffisamment mâchés....

5/ Manger des champignons représente à mon avis une sorte de plaisir intellectuel car ils n'apportent quasi rien à notre organisme sur le plan nutritionnel (quelques rares sels minéraux et plus de 90 % d'eau)

6/ On peut trouver une signification évidente dans le fait que la plupart des mycologues (il reste des irréductibles...) ne mangent pas ou plus de champignons (alors qu'ils sont vraisemblablement les mieux placés pour les récolter et les déterminer avec un minimum d'erreurs)

Cependant, étant un fervent adepte de la liberté de pensée et d'action (à condition qu'elle n'empiète pas sur celle des autres ...), je considère que chacun est libre de faire ce qu'il veut de sa santé et de sa vie, et mon texte ci-dessus n'a qu'une modeste valeur informative....

Amitiés et bon dimanche

M ;)

Quelques photos pour mes débuts en mycologie.

C’est un champignon que j’identifie comme un clitocybe nébuleux (lepista nebularis). Mais sous toute réserve.

J’ai observé son hyménium en épiscopie. Je compte bientôt utiliser des colorants en suivant les excellents conseils trouvés sur le site de Marcel Lecomte que je remercie au passage pour ses encouragements.

L’insertion des lames sur la marge.

Microscope orthoplan Leitz Système ultropak Objectif 6,5x

Grossissement 60x environ Coolpix 995

Hyménium pariétal, on voit les 4 spores des basides (je ne sais pas si le point central est une spore ou un élément de la baside)

Frédéric (Bret)

Voir la réponse de Marcel Lecomte

Voir la réponse de Claude Lejeune

Je remercie vivement Marcel pour ses critiques constructives et pédagogiques, et ses images dont je vais m’inspirer. Il n’est pas si simple de mettre ces éléments en évidence surtout quand on utilise, comme je l’ai fait, une technique inadéquate. J’espère fournir bientôt des images de basides avec une coloration ad hoc.

J’ai quand même réussi ( ?) à visualiser quelques éléments qui ressemblent à des basides tétrasporiques en vue aèrienne (à travers les nuages car c’est un clitocybe nébuleux… :) )

Orthoplan Objectif 40x 0,95

Marcel, j’ai interrompu momentanément mon étude du clitocybe nébuleux faute de combattants, il n’y en a plus dans mon jardin et le débutant que je suis n’a pas eu la présence d’esprit de faire des exsiccata, c’est un réflexe à acquérir, je promets de garder des spécimens secs des espèces que je rencontrerai pour les étudier pendant les soirées d’hiver.

Mais je n’ai pas dit mon dernier mot, j’ai vu aujourd’hui, sur une souche, des polypores versicolores (trametes versicolor) que je vais me faire une joie d’observer.

Le texte que tu cites est particulièrement intéressant car il souligne un caractère curieux de certains champignons, l'inconstance de la toxicité pour une espèce donnée. Je me pose cette question: Existe-il des réactifs mettant en évidence au microscope la localisation de toxines?

Quelques questions, Robert !

Tu dis avoir trouvé les "nébuleux" dans ton jardin ... sous quel arbre ?

Ta question : Existe-il des réactifs mettant en évidence au microscope la localisation de toxines?

Je n'en ai jamais entendu parler ... Mais il faut savoir que des tests chimiques macroscopiques simples permettent d'identifier à coup sûr certains champignons mortels.

Exemples :

la cuticule du chapeau d'Amanita virosa devient instantanément jaune citron à la potasse en solution à 10 %

les lames d'Amanita phalloides deviennent mauve violet sous l'action de l'acide sulfurique

Voilà des tests tout simples qui pourraient sauver des vies .....

Bonne soirée à tous les "branchés" !

M :)

...Et merci Claude pour ta mise en garde qui m'a certainement épargné des efforts inutiles. Le forum est un remarquable outil pour progresser, il permet de rectifier le tir en cas d'erreur, et cela presque en direct, (disons avec un léger différé).

Je vais rechercher d'autres champignons plus compréhensifs pour le mycologue débutant que les polypores. Je n'avais pas pensé aux corticiacées, comment fait-on pour prélever, on gratte? On décolle? On prélève avec le substrat?

Si j'en trouve demain je ferais différents essais.

Merci Marcel et Claude pour vos réponses si instructives.

Marcel, j’ai trouvé les clitocybes, (j’ai failli écrire clito en abrégeant mais cela pourrait semer la confusion parmi les esprits peu avertis), dans mon jardin sous des érables, des châtaigniers et des chênes. Ils étaient assez nombreux, environ 20 ou 30 individus, plutôt regroupés. Je ne pense pas avoir fait de confusion avec l’entolome livide, mais je n’ai pas suffisamment de pratique pour en être certain.. Quant à l’odeur je trouve qu’ils ont... une odeur de champignon, sans plus; là aussi j’ai des progrès à faire.

Claude, merci pour ces précisions, il n’était pas dans mon intention de déterminer le caractère toxique d’un champignon par un examen microscopique alors que, comme tu le rappelles, l’observation des caractères botaniques est suffisante pour que l’on s’en tienne là. Mon désir était de traquer le poison en l’observant in situ révélé par un réactif quelconque!

PS: Claude, merci pour ta longue et très complète réponse à propos des corticiacées, Je vous ferai part de mes découvertes dès qu'elles seront présentables.

Amicalement,

Frédéric (Bret)

Je profite de ce sujet pour poser une question un peu simpliste concernant la mycologie et la microscopie:

A part les spores, quels éléments du champignon peut-on observer au microscope?

J'imagine, bien sûr que l'on peut faire des coupes, les colorer et les observer, mais plus de détails m'intéresserais!

Une autre question: Quel livre conseillez-vous? J'ai déjà des "guides des champignons" mais j'aimerais un manuel qui soit plus scientifique et qui aborde les moyens d'études comme la colorations, la microscopie, l'étude du terrain etc...

Merci d'avance,

Frédéric (Bret)

Faisons bref, car comme dit en bavardages, pour répondre correctement, il faudra un peu plus de temps et surtout de la méthode. Ca viendra...

Ceci n'est qu'un très rapide aperçu.

Que voir ?

Les réponses varient selon la catégorie des champignons qu'on étudie. En règle générale :

- Les spores (mures), bien sûr.

Taille et forme ; métachromasie (c'est à dire changement de couleur induit par certains réactifs : l'iode et le bleu de crésyl étant les grands classiques) ; dessin ornemental en cas d'ornements (et taille de ces ornements), etc.

Mais le niveau d'information de ce caractère lui-même est fluctuant selon les genres : relativement pauvre par exemple chez les tricholomes, les clitocybes, etc., il peut être crucial dans d'autres genres (ou sous-genres ou sections...).

Les spores de russules sont ainsi parmi les plus riches en informations.

(Cette relativité s'applique bien sûr à tous les caractères observables).

- les cellules stériles de l'arrête et (ou) des faces des lames (voir ici même sous "cystides")

- les cellules constitutives du revêtement du chapeau (la "cuticule"et ses différentes "states") : forme, contenu, taille et tutti quanti

- les pigments (localisation du pigment : vacuolaire, membranaire, etc.).

- la présence de cloisons et (ou) de boucles - des petites anses au niveau des cloisons - sur les cellules. Cellules qu'on appelle en fait les "hyphes" chez les champignons, en raison de leur nature filamenteuse.

Ces observations se font, par ordre croissant de difficulté, sur :

- des dilacérats (fragment écrabouillé) quand on sait ce qu'on cherche et que l'organisation des tissus importe peu;

- des scalps (prélèvement des surface en coupe fine ou en "épluchage");

- des coupes radiales.

On observe les tissus dans un colorant "universel" d'abord (rouge congo SDS ou amoniacal), on affine en fonction de ce qu'on cherche ensuite.

Que lire ?

Vaste sujet.

Commencer par un incontournable, passage obligé ou presque de tous les apprentissages : "La description des champignons supérieurs" de Marcel Josserand, un Maître du siècle révolu, à l'écriture fluide, belle et précise - un humaniste comme il n'en existe plus guère.

(Fouiller le Net : les deux premières éditions, 1952 et 1983, sont épuisées, la troisième, dont je n'ai pas les références, serait en passe de l'être...)

Ensuite : un clé d'orientation générale. Là encore, la meilleure des clés "généralistes", pour démarrer (...et aller bien plus loin ensuite), est épuisée : La Flore des Champignons supérieurs de R. Kühner et H. Romagnesi (1953). En fouillant, on trouve - ou on photocopie...

Enfin : des clés monographiques (dédiées à un seul genre et réservées non pas à des "spécialistes" mais à des "généralistes" déjà familiarisés avec les techniques d'observation de base).

La connaissance d'une ou plusieurs langue étrangères étend évidemment le champ bibliographique. Le vocabulaire nécessaire est assez restreint : on apprend vite (pour peu qu'on le veuille !). Il existe d'ailleurs des glosssaires en 6 langues ou plus.

Je reviendrais un de ces quatre plus en détail sur la question, comme promis et en l'illustrant. En attendant, n'oubliez pas qu'un moteur de recherche judicieusement utilisé et un peu d'entêtement permet déjà de trouver des réponses à quantité de questions, notamment bibliographiques...

Cordialement,

Claude

Ces cystides sont appelées CYSTIDES MURIQUEES (dans le cas des Inocybes, où le sommet est hérissé de cristaux d'acide oxalique) ou LAMPROCYSTIDES (dans un sens plus large, chez certains Plutées ou Pleurotes).

photo x10

Cette préparation est assez simple à réaliser, puisqu'il suffit de dissocier par écrasement un petit bout de lame de l'hyménium.

Hésitant à placer cet objet dans OMNI,j'ai décider de le mettre dans mycologie,car il pourrait s'agir d'une conidie de champignons enroulée

La récolte s'est faite à 1000m d'altitude dans une tourbière

La spirale fait env.54µde diamètre et n'est pas dans un même plan d'où les 2 photos avec des focalisations différentes

Qu'en pensez vous?

x40 fluotar

coolpix4500

Encore une petite zigote pour la route...

trouvée dans l'Eure, je n'ai jamais vue une telle découpe au bout des branches !!!

La nature est quelquefois un peu folle

amitiés

Dominique

Le mystère est résolu ici !

http://forum.MikrOscOpia.com/index.php?sho...hl=microsphaera

Qu’est-ce que c’est ?

Un ver enroulé, le haut d’une coquille ?

J’en ai aucune idée !!

Tourbière Obj.10x

A bientôt

Christian

comme annoncé à la suite de ma présentation, voici une image d'"oïdium" du sureau. En fait, je n'aurais pas du utiliser le terme oidium qui est connoté en français courant maladie de la vigne.

Le terme d'erysiphacée convient mieux pour cette famille de champignons parasites des végétaux qui recouvrent de blanc différents végétaux. Leur fructifications ou périthèces apparaissent comme des points noirs sur les feuilles. Au microscope, c'est un disque garni d'appendices appelés fulcres.

Ma récolte vient d'un sureau rameux; ce n'est pas l'espèce la plus spectaculaire. Cherchez sur le chène, les fulcres sont très ramifiés...

L'image serait à refaire avec un sujet aplani et un capteur propre!

DN

Les champignons vont sortir!!!!

Trouvé à Villard de Lans 38 sur souche d'épicéa terrain calcaire cette plutée qui vu le liseré foncé sur l'arête des lames ,le chapeau (faiblement) squamuleux et les pleurocystides à crochets semblent indiquer Pluteus nigrofloccosus (ou atromarginatus ou tricuspidatus ) Qu'en pensez vous?

Michel

Voici une réaction dite amyloïde, qu'on retrouve essentiellement chez les Russulacées (Lactaires et Russules). Elle est obtenue grâce à un liquide iodo-ioduré appelé Réactif de Melzer.

Si on observe les spores dans l'eau, les ponctuations ou les crêtes des spores sont quasi invisibles ! Le réactif les colore en violet-noirâtre. On utilise ici la coloration donnée par l'iode à des substances complexes amidonnées.

Dans d'autres cas, l'iode va donner des réactions colorées en orange rougeâtre : on parlera alors de réaction dextrinoïde !

Ici, il s'agit des spores de Lactarius evosmus, un Zonarii ; remarquez l'apicule qui est très visible.

Bonne soirée à tous

M ;)

Je voulais présenter ce petit champignon (que j' ai découvert l' automne dernier dans mon jardin) pour la forme très allongée de ses spores.

Voici pour commencer un scan direct du carpophore.....

C'est une grosse espèce, à chapeau blanc, semblable à une amanite sans anneau (volve évidente quand on le déterre avec précautions), mais avec les lames roses

M :)

Intéressant pour la micro car les spores sont plus grosses que chez la plupart des Basidiomycètes !

Après l'oïdium de la vigne,voici l'autre maladie cryptogamique de la vigne :le mildiou

Il sera présenté ici sur feuille.Cette année,il est très discret dans le vignoble alsacien

Les symptômes sur feuilles correspondent à une tache jaunâtre sur le dessus de la feuille,alors qu'en dessous l'on trouve un duvet blanchâtre en regard de cette tache.

Le duvet en question est formé par les conidiophores et les conidies.

Le traitement pour contenir ce parasite est -à part les fongicides organiques de synthèses- la bouillie bordelaise, qui est toujours encore efficace(sulfate de cuivre neutralisé à la chaux)

x25 soluté de Lugol coolpix4500 filtre bleu

parmi les maladies cryptogamiques de la vigne,en voici une qui est bien présente dans le vignoble alsacien:l'oïdium

Macroscopiquement,il se présente comme une poudre cendrée sur les jeunes raisins.Le plus souvent,la pénétration du mycélium aboutit à l'éclatement de la baie

Vue des conidies à la surface de la baie x16

les conidies au x40 et colorée au Lugol

coolpix4500

Salut André et Michel,

Je suis d'accord avec Michel, c'est un beau sujet, et tu sais que j'aime assez les moisissures....

Juste une remarque à propos de la "pouriture noble", il me semble avoir lu quelque part qu'il s'agissait du Botritys... il serait interessant de comparer (quand ça sera l'époque) avec celle que j'avais identifié sur mes tomates dans un sujet du mois de janvier... Botritys

Enfin je suis définitivement rassuré... il restera à boire dans le vignoble Alsacien :D

Salut Dominique

Cela parait effectivement dramatique,mais ces grappes sont très rares,ce sont surtout des baies parci parlà qui sont touchées,et ceci que dans certaines parcelles,sur certains cépages(ici le pinot auxerrois)

Le soufre arrive à contenir la maladie...le raisin est sensible à l'oïdium tant qu'il a une activité photosynthétique.Dès qu'il arrive au stade de la véraison(cad dès qu'il se met à produire du sucre)l'oïdium n'y a plus prise!

Je pratique des coupes actuellement pour essayer de mettre en évidence la pénétration des suçoirs du mycélium

Sur la baie,on observe des tâches brunâtres qui correspondent aux cellules attaquées par le mycélium(photo jointe)

x25 coolpix4500