Dominique Prades
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Messages posté(e)s par Dominique Prades
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Bonjour,
Mon espace microscopie se situe dans mon salon. Je ne dispose que de peu de place, mais avec un peu d'organisation, celà me suffit pour le moment.Tout le petit matériel est rangé dans des bacs plastiques sous le micro, et le petit PC est dédié à la microscopie.
A bientôt
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Bonsoir à tous,
Nous savons que les feuilles des végétaux sont recouvertes par une couche de cellules épidermiques non chlorophylliennes qui possèdent une cuticule externe assez peu perméable.Les échanges gazeux (absorption de CO2, rejet d'oxygène, de vapeur d'eau) entre les cellules chlorophylliennes et l'atmosphère se réalisent donc par l'intermédiaire d'un orifice,le stomate.Ceux ci régulent donc la transpiration dans les organes aériens des végétaux.
On les trouve surtout sur la face intérieure des feuilles lorsque celles ci sont disposées horizontalement ( la moins éclairée).Les feuilles du chêne rouvre par exemple possèdent 450 stomates au mm2 sur l'épiderme inférieur mais n'en possèdent pas sur l'épiderme supérieur.
Dans le cas des feuilles dressées qui sont illuminées de manière égale,on trouve des stomates sur les deux faces (le blé par exemple où l'on trouve une moyenne de 33 stomates au mm2 sur l'épiderme supérieur et 14 sur l'épiderme inférieur).
Chez les feuilles flottantes des végétaux aquatiques, ils sont situés sur la face supérieure.
Les cellules stomatiques sont déformables et chlorophylliennes (elles renferment des chloroplastes).Les stomates sont construits sur un même type, deux cellules en forme de graine de haricot ( réniformes) sont juxtaposées aux deux bouts,leurs faces concaves à l'intérieur.L'ouverture qu'elles laissent entre elles se nomme l'ostiole.Celle ci débouche sur un grand espace intercellulaire,la chambre sous-stomatique et communiquent avec le système intercellulaire du végétal.
L'ouverture ou la fermeture de l'ostiole est provoquée par des variations de turgescence des stomates (appelées aussi parfois cellules de garde), qui entraine une modification de forme et de volume.
Plusiers végétaux se prêtent facilement au montage sur lame de leur épiderme (le poireau, le chou, l'iris et la fougère par exemple) car celui se détache assez facilement.
En vue de récuper l'épiderme d'une feuille de poireau, j'ai plié fermement une feuille dans sa largeur (pour ce végétal, peu importe le côté) .L'épiderme supérieur se fracture donc du côté extérieur à la pliure et on peut récupérer l'épiderme inférieur en tirant doucement sur les deux morceaux de la feuille.Avant de le couper, j'ai glissé une lame humidifiée au contact afin que cet épiderme ne s'enroule pas sur lui-même.
Vue générale
au X20 Aiptek webcam , vert de méthyle acétique
A présent, voici quelques vues de stomates de différents végétaux.
Pour la première, j'ai tenté de retirer l'épiderme d'une feuille de chou, non sans mal malgré l'avoir faite bouillir. Par transparence apparaissent des chloroplastes du parenchyme palissadique sous-jacent.
X20 CanonA70
Des stomates d'une petite plante grasse tropicale,décorative, Rhoeo discolor.Ils sont flanqués de cellules annexes.Le noyau de chaque cellule de garde est parfaitement visible.
X20 CanonA70
Maintenant des stomates de fève (vicia faba).Les cellules possèdent une forme sinueuse et lobée.Elles sont imbriquées les unes dans les autres à la manière des pièces d'un puzzle.
X20 CanonA70
D'une coupe transversale de blé (Triticum aestivum), deux stomates, l'un clos et l'autre ouvert.
Webcam ToUcam X40
Et pour terminer, un gros plan au X40 sur une cellule de garde de poireau, photo issue de la préparation du premier message (en bas).
Ce post faisait donc, vous l'aurez compris, l'objet d'un autre TP.
Microscopistes,à vos lames et .........poireaux. :lol:
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Bonsoir à tous,
Je vous propose ce soir un deuxième "travail pratique" ,le premier étant les nauplies d'artémia salina.
Celui ci est un peu plus complexe mais à la portée de la plupart d'entre nous.
Il s'agit d'extraire les glandes salivaires d'une larve de chironome en vue de l'observation des chromosomes géants que contiennent celles ci.
Les chromosomes se situent dans les noyaux de toute cellule.Ils sont surtout visible quand celle ci se divise.
Il sont de surcroit facilement colorables et particulièrement gros chez certains insectes.
Les larves de chironomes,nommées improprement larve de moustique ou ver de vase se trouvent dans la partie supérieure de la vase des petits cours d'eau chargés en matières organique.
Vous pourrez vous en procurer aisément chez votre magasin spécialisé en articles de pêche, sous l'appellation de "fouilli" (il sert en fait à l'appât de la friture).A noter que les pêcheurs se servent d'une variété beaucoup plus grosse (15/20mm) pour monter au bout de l'hameçon.
Je vous explique tout celà car j'ai un peu peiné avec mes toutes petites bêtes de 8mm ,des larves plus grandes facilitant les opérations.
Il faut donc poser la larve sur une lame.Si elle est agitée (elle doit comprendre la suite de la manipulation
:( ), la calmer avec une bonne goutte d'alcool par exemple.Repérer la tête ,appuyer sur la partie postérieure avec l'ongle d'un doigt (pour bloquer l'animal) et tirer sur la tête (dans le sens opposé bien sûr) avec un outil tel que aiguille lancéolée,lame de bistouri très émousée.Il faut que les glandes salivaires soient arrachées avec la tête.
Pour la coloration des chromosomes,j'ai oeuvré avec du vert de méthyle acétique , mais du bleu de toluidine ou de l'orceine acétique sont également valables, tout comme la coloration de Feulgen .Je pense que le bleu de méthylène pourrait à la rigueur convenir .
Montage à la glycérine gélatinée
Les deux photos de ce message avec la webcam aiptek
Objectif X2 et X10
larve de chironome
les chromosomes
Quelques photos au X40 et ToUcam.On perçoit l'alternance des bandes sombres et claires des chromosomes,mais suivant le colorant utilisé,la perception de l'information visuelle sera différente.
A bientôt
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Nikon Labophot2
dans NIKON
Bonsoir ,
Voici un microscope des années 1990.
Celui ci possède un condenseur pour contraste de phase avec tourelle à 6 positions (fond clair,fond noir avec disque et 4 anneaux de phase).
La tête trinoculaire possède une tirette à 3 positions pour répartir le flux lumineux.Il est prévu pour travailler en Lumière polarisée analysée.La pièce où se loge l'analyseur est rotative avec une échelle à vernier.
Une lame quart d'onde de Sénarmont y est intégrée et amovible.Voir ce lien http://www.microscopyu.com/articles/dic/de...montconfig.html
En outre,cette pièce possède une double molette qui positionne dans le champ une lentille de Bertrand ainsi que pour sa MAP (idéal pour le centrage des anneaux de phase)
Oculaires X10/20 classiques
La pièce intermédiaire
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Bonsoir à tous,
Une Striatella unipunctata en contraste de phase.On perçoit le richesse de l'ornementation,avec des bandes longitudinales mais aussi en diagonales
Prélèvement en zone portuaire de Punta Cana (république Dominicaine).
Sujet conservé au formol.
Objectif X40 ToUcam assemblage de 2 images (désolé pour le format)
A bientôt
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Finalement ,un éclairage TRES légèrement oblique suffit pour nous donner beaucoup plus de détails (normal!!).
A bientôt
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Re,
Même image ,même technique mais en couleurs.Il n'y a guère d'informations supplémentaires.
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Bonjour le Forum,
Je vous présente une diatomée du genre Auliscus.Je pencherai pour Auliscus gigas mais ,mis à part le guide de Loir, je manque de données et d'informations ,le Web étant peu prolyxe sur ce genre là.
Les valves sont légèrement bombées, et sont caractérisées par 2 paires d'ocelles.Elles sont diamétralement opposées de part et d'autres du frustule.
Je vous poste la même image avec des techniques différentes.
Ce ne sont pas les photos en elles mêmes qui m'ont demandées du travail ,mais toute la préparation avant le montage des lames.
J'ai en effet reçu un petit prélèvement compact fossile diatomifère de Newport beach (état de Californie).
Je me suis mis en quête de renseignements pour décompacter en douceur les petits blocs afin de ne pas trop briser de diatomées.J'ai utilisé pour celà de l'eau peu minéralisée et j'ai congelé et décongelé le tout maintes fois.
Je suis passé ensuite à des nettoyages plus classiques,peroxyde d'hydrogène (110 vol.) porté doucement à ébullition pendant 1 bonne heure,puis HCL ,toujours porté à ébullition. Décantations pour évacuer les trop fines particules.
Montage au Zrax (et là aussi ,il faut chauffer les lames à 80°C pendant plusieurs
heures)
Objectifs X40 To U cam. longueur de l'image environ 70µm
Première photo CP , filtre vert jaune.
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Bonsoir le Forum,
j'avais demandé à une amie qui passait ses vacances en République Dominicaine de prélever pour moi un petit échantillon.
Cette diatomée originale a été trouvée sur une petite touffe d'algue ,attachée à une corde de bateau.Le prélèvement a été aussitôt formolé et ,après traitement adéquat ,j'ai monté quelques lames.
J'ai hésité lors de l'identification entre Rhabdonema adriaticum et R. arcuatum.
Vue vraisemblablement connective.65µm
Objectif X40 ToUcam
A bientôt
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Bonsoir le Forum,
Une autre Cymatopleura librile d'une taille d'environ 250µm.J'ai choisi le CP car il me donnait une meilleure lecture du frustule qu'un éclairage oblique.
Celle ci est assez constrictée en son centre.
Je m'excuse de vous la présenter dans ce sens dont la visualisation est un peu désagréable mais dans le sens horizontal (en 750 pixels),sur des diatomées aussi longues,on perd beaucoup d'informations.
montage de 3 images.ToUcam et X40
A bientôt
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Bonjour à tous,
Pour étoffer le sujet,une autre pinnularia maior.environ 255µm.
On perçoit moyennement la sinuosité du raphé car la MAP est sur les côtes.
Montage de 4 images.Objectif X40 ToUcam (mon bloc-note,quoi :lol: !!)
A bientôt
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Et pour terminer,un petit groupe qui démontre la densité de ces créatures.
X10 ToUcam
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Re,
L'aire centrale en gros plan,en éclairage davantage oblique.On compte généralement de 12 à 16 stries pour 10µm.Ici,le spécimen est proche des 16stries,que l'on perçoit nettement perlées.
X40 ToUcam
A bientôt
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Bonsoir à tous,
En voici une autre,montée au Zrax.Elle est de bonne taille puisque elle avoisine les 260µm.
Montage de 4 images.ToUcam et objectifX40.Eclairage légèrement oblique.
De visu,c'est une diatomée réellement magnifique!!!!
A bientôt
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Bonsoir à tous,
Une autre Diploneis trouvée dans mes lames de diatomées fossiles.La valve de celle ci est nettement moins étranglée que Diploneis bombus mais l'ornementation est plus "grossière" (semble t'il ) que chez dydima.Néanmoins les côtes transversales paraissent fortes comme chez bombus (mais je ne vois pas les côtes longitudinales dont parle Loir ).Il rest bien sûr l'hypothèse d'une autre variété.
Le genre me parait complexe.
Assemblage de 2 images .ToUcam.Prise de vue en fond clair.
X100
A bientôt
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Bonjour à tous ,
Ce que je pense être une nouvelle venue dans la base de données.
Lyrella elliptica en vue valvaire , trouvée dans une préparation de diatomées fossiles de Dunkirk.
Assemblage de 2 images.To Ucam
X40
A bientôt
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Et maintenant avec (toujours posé sur le collecteur ).
Le chromatisme a été affecté et j'ai poussé la pauvre Led de 1 Watt à fond.
J'attends vos réactions avec impatience,je vous dirai ce que c'est ,mais je vais d'abord essayer sur des leucocytes, car c'est quand même farfelu.
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et maintenant avec le Leitz X100 ,sans la bidouille.difficile d'avoir unemise au point bonne sur tout le champ :(
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Re,
Sans rien toucher aux réglages du microscope,juste en posant le machin sur le collecteur.Il m'a fallu juste augmenter l'intensité de la Luxeon.
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Bonjour ,
Comme tout microscopiste qui se respecte,je m' interresse un peu aux diatomées
(ça doit être une tradition chez les Dominique :D )
N'étant qu'à moitié content de la ToUcam 2 (pour les diatomées),j'avais un peu augmenté le contraste (en Noir et Blanc) en utilisant un filtre vert jaune destiné à l'origine au contraste de phase.
Je reçois donc hier un superbe Leitz X100 NPL fluotar (merci Jean Marc :rolleyes: ) et je constate que c'est un peu mieux que celui que j'utilisais mais que j'étais loin des bonnes photos du Forum.N'ayant pas de condenseur fond noir (du Nikon en occasion sur ce genre d'article,c'est la croix et la bannière!!!!!),je décidais donc d'aller chercher au grenier les filtres cyan et magenta qui étaient autrefois destinés aux papiers Ilford à contraste variable.
Evidemment,je n'ai pas trouvé les filtres en question mais mon regard s'est posé sur un vieux "zinzin"optique que je décidais de redescendre de ce fichu grenier dans le seul but de le dépoussierer (aussitôt dit ,aussitôt fait).
Et bêtement,j'ai posé ce truc sur le collecteur de mon microscope,juste pour voir!
Comme sur ma lame de diatomées fossiles il y avait quelques Pleurosigma ,j'ai voulu essayer.
Première photo avec un X40 Olympus SP ON 0.7 SANS le "zinzin"
AUCUNE retouche photo,juste la conversion sous photoshop de Bitmap en JPG
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Bonjour le Forum ,
Voici une nouvelle vue pour étoffer le sujet ,avec une technique d'éclairage qui me donne plus de contraste et de relief.
Assemblage de 2 images.
La diatomée mesure à peine 70 microns.
X100 Leitz
Bonne journée
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Bonsoir,
On peut lire ici ou là qu'il faut toujours déposer la goutte d'alcool contenant les diatomées sur la lamelle et non sur la lame (risque de dégradation de la qualité de lecture).
Je n'ai par contre jamais trouvé l'explication de cette affirmation.
Peut être vaut il mieux que les diatomées soient le plus près possible de la lamelle après pose du média de montage,pour que justement il y ait le moins possible d'épaisseur de média entre la diatomée et la lamelle????????
A bientôt (j'attends avec fébrilité vos réponses)
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Bonsoir,
Voici ma modeste contribution à ce sujet.
ObjectifX60 ToUcam 7 images combinées avec CZ4,CZ5 ayant été un peu moins performant sur cette photo.
montage perso. au Baume du Canada
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Bien entendu,une des premières choses que j'ai voulu observer dès que j'ai eu un microscope,ce fût mon propre sang.Bien sûr,j'avais réalisé quelques frottis en lisant les dossiers de microscopies.com.
Michel m'ayant prété une lame en me demandant de faire quelques photos,j'ai voulu en savoir un peu plus.
Constitution générale du sang.
Le sang a toutes les caractéristiques d'un tissu.Il se compose de cellules (globules) et d'une substance inter-cellulaire,le plasma.
Les éléments figurés du sang sont de trois types.On peut distinguer les érythrocytes ou hématies (globules rouges) ,les leucocytes
(globules blancs) et les thrombocytes (plaquettes sanguines) .
Les globules rouges se présentent sous forme de petits disques biconcaves d'un diamètre de 7 à 8 microns.Le nombre de G.R est de
4.5 à 6.5 millions par mm3 (chez l'homme).Le constituant essentiel des G.R est l'hémoglobine,pigment rouge responsable du transport
de l'O2.La formation des G.R (érythropoïèse) s'effectue essentiellement au niveau de la moëlle osseuse.Leur durée de vie moyenne
est de 4 mois.Ils sont détruits dans la rate.La cellule est capable de se déformer légèrement lors du passage dans les petits capillaires
sanguins.
Les globules blancs sont des cellules nuclées ,capables de mouvements actifs (mouvements amiboïdes).Ils peuvents se déplacer à
contre-courant,franchir la paroi des vaisseaux sanguins (diapédèse) et pénètrer dans les tissus.On compte environ 7000 G.B au mm3.
On peut distinguer :
Les cellules mononuclées et les polynucléaires ou granulocytes et les thrombocytes (plaquettes) .
A Les cellules mononuclées:
1 Les lymphocytes sont les plus petits des leucocytes .Ils sont identifiables grâce à un large noyau occupant une bonne partie de la
cellule (rapport noyau/cytoplasme élevé) .La plupart des lymphocytes sont formés au niveau de la moëlle osseuse.Ils interviennent dans
les réactions immunologiques de l'organisme.On peut distinguer le petit lymphocyte (diamètre 9-11 microns,noyau rond et dense,
cytoplasme basophile bleu clair) et le grand lymphocyte (10-15 microns de diamètre,arrondi déformable ,cytoplasme bleu clair)
2 Les monocytes sont de grandes cellules,avec un noyau relativement grand ,cytoplasme très grand , d'un diamètre de 18 à 21 microns,
couleur grisée à terne,vacuolé ,arrondi et très déformable.
B Les polynucléaires ou granulocytes :
Les polynucléaires neutrophiles,éosinophiles et basophiles possèdent des noyaux divisés plurilobés ,connectés entre eux par
un fin tractus de matériel nucléaire.Ils contiennent des granulations cytoplasmiques qui se colorent de manière différente selon le type.
Généralement, plus il y a de lobes, plus la cellule est vieillissante.
1 Les neutrophiles ont un noyau constitué de 3 à 5 lobes ,avec un cytoplasme contenant des granules très petits (se colorent en bleu ou
gris)
2 Les éosinophiles ont généralement un noyau bilobé avec de gros granules cytoplasmiques (se colorent en rouge)
3 Les basophiles possèdent habituellement un noyau masqué par les larges granules cytoplasmiques (coloration en bleu sombre)
La fonction principale des G.B est de protéger l'organisme contre les diverses agressions.Les leucocytes neutrophiles et les monocytes
détruisent préférentiellement les bactéries en les ingérant (phagocytose)
Les thrombocytes (plaquettes sanguines) sont des petites unités granuleuses anuclées de 2 à 4 microns de diamètre (300.000/mm3).
Elles trouvent leur origine dans la moëlle osseuse.Elles participent de manière importante à l'hémostase (arrêt de l'hémorragie)......
re,
Une vue parcellaire d'un frottis,coloration au May-Grünwald Giemsa.Le média de montage est de l'huile de Cèdre.Si le frottis est bien "étiré",vous verrez l'image ci-dessous.Nous apercevons de nombreux GR ,2 GB,ainsi que quelques plaquettes.
Eclairage (un peu) oblique. Objectif X20 et ToUcam
Pour les inconditionnels ( :lol: ) du CP,(pas du cours Préparatoire mais plutôt du Contraste de Phase),nous voyons ici que sur ce genre d'observation,la technique de la coloration est grandement préférable.
Un GB en plein centre de l'image...
Objectif X40
Voici une "agglomération forcée"(par le coup de main de Michel) de 7 GB.
Légende:
PN polynucléaire neutrophile
PL petit lymphocyte
GL grand lymphocyte (certainement),nommé plus souvent cellule hyperbasophile.
objectif X40 Olympus Splan Eclairage toujours un peu oblique.
Je vous propose quelques images au X100 des différents types de GB.
Nous avons plus bas un Polynucléaire neutrophile jeune,dit aussi métamyclocyte
neutrophile (anormal si en grande quantité)
longueur de l'image ,environ 35 microns
A noter la "déformabilité" des cellules.
Ci-dessous,un polynucléaire éosinophile,avec noyau bilobé.Notez les gros granules cytoplasmiques.
polynucléaire éosinophile
Objectif X100
polynucléaire éosinophile
Je vous propose maintenant une image d'un polynucléaire neutrophile,toujours au X100.
Le cytoplasme contient des petits granules..
polynucléaire neutrophile
objectif 100X
Un autre polynucléaire neutrophile.Plus on compte de segmentations,plus le PN est agé.
polynucléaire neutrophile
Une image,maintenant, d'un polynucléaire Basophile.
Il possède généralement un diamètre de 11 à 13 microns.Il est de forme arrondie et se compose de 2,3 ou 4 lobes.Affinité acidophile clair du cytoplasme avec des granulations violet bleu (affinité métachromatique) devant le noyau.
polynucléaire Basophile
Abordons à présent le GB nommé monocyte.
C'est une grande cellule (18 à 21 microns) de forme arrondie mais très déformable,avec un grand cytoplasme.Le noyau est de forme très variable.
Affinité basophile clair du cytoplasme,qui possède de nombreuses granulations , mais qui sont très fines (visualisation difficile).Ces granulations sont dispersées dans tout le cytoplasme et sont azurophiles.
Notez les vacuoles.
monocyte
Encore un autre monocyte.
monocyte
Les lymphocytes se forment à partir des cellules réticulaires des organes lymphatiques.Leur cytoplasme est réduit et leur aptitude aux mouvements amiboïdes s'en trouve limitée.On distingue le grand et le petit lymphocyte.
Le grand lymphocyte (ou cellule hyperbasophile ou lymphocyte activé) :
D'une taille d'environ 10 à 15 microns,il possède un aspect général plus ou moins arrondi mais déformable.Affinité basophile clair du cytoplasme , sans granulations ou possibilité de quelques granulations azurophiles moyennes regroupées.
Au contraire des polynucléaires,les mononucléaires possèdent un noyau assez compact.Celui ci est excentré dans le GL ,il est aussi plus clair que dans le PL.
grand lymphocyte
Le petit lymphocyte:
Il possède un noyau arrondi, central voire peu excentré.Il occupe une très grande surface de la cellule (9/10 ème), qui, elle même, est assez petite (9 à 12 microns).
La forme générale est assez arrondie avec un noyau plus foncé que celui du GL.
Affinité basophile clair du cytoplasme sans granulations.La couronne de cytoplasme est très réduite.
petit lymphocyte
Sur la droite,un autre petit lymphocyte de la lignée T (dit aussi cellule T ou thymocyte).
A gauche,un élément anormal s'il est trouvé en grande quantité (assimilé à une grande plaquette)
Initialement,je pensais à un petit lymphocyte,mais il pourrait aussi s'agir d'un érythroblaste basophile (cellule médullaire) qui possède un rapport noyau/cytoplasme plus faible.
érythroblaste basophile
Maintenant,une image qui représente,entre les hématies,3 thrombocytes (plaquettes) ,corpuscules sanguins anuclées,avec des formes irrégulières
Affinité du cytoplasme, basophile clair.granulations azurophiles.
plaquettes
Sur sang frais,deux GB ,en lumière très oblique,pour démontrer si besoin en était,
l'utilité d'une coloration.En fond clair,on ne voit que les hématies...
sang frais,
X100
Si cette image est originale et un peu exotique,grâce notamment à une préparation (manutention) un peu particulière de la part de Michel ,ceci reste une disposition non conventionnelle d'un frottis.
Entomoneis alata (Amphiprora alata)
dans Diatomées (Collections)
Posté(e)
Bonjour,
Deux images complémentaires pour situer la complexité du frustule de cette diatomée.
La première en fond clair, la deuxième en CP en N&B.
Montage au Zrax
dimension du frustule dans la longueur 230µm
Objectifs X40
CZ 5 14 images