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Coloration safranine - bleu astra


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#1 Dominique.

Dominique.

    Anthropoïde

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  • 888 messages

Posté 05 décembre 2022 - 06:10

suite à  l’ article   de Patrick

https://forum.mikros...ine-bleu-astra/

 

 

La  coloration Safranine Bleu / Astra  est  une excellente  formule de  coloration  une fois réglé  les dilutions  des colorants que l’ on possède  .Cette adaptation est  toujours individuelle   en raison  des nombreux paramètres  qui  entrent  en  jeu et qui diffèrent  d’un laboratoire à un autre .

Coupe d'une tige de géranium

[

 

geranium 80.jpg

geranium 100.jpg

geranium 200.jpg

 

Un autre paramètre  à bien maîtriser   est  la réalisation de la coupe – plus  la  coupe  est fine  meilleur  sera  le résultat – Mais réaliser  une coupe très fine et homogène  n’ est pas  facile  et le type de microtome  que l’ on  choisit  à une place considérable 

Quels sont les types de microtomes : 

2 types  de microtome  sont  surtout  à retenir.

  A    Microtome  à cylindre

L’ échantillon   doit  être maintenu par  un support  -  nos anciens utilisaient  la moelle de   sureau     ( c’est cette  technique  qui est à l’ origine  de très  nombreuses    découvertes en  botanique)   De nos  jour la moelle de sureau  est remplacée  par le  polystyrène , il faut au préalable  couper à l’emporte-pièce un cylindre de polystyrène  d’une  taille  un peu supérieure au diamètre  du  cylindre   et  le mouler en le roulant entre les mains.

   Avantage  une excellente  compression de l’ échantillon  qui  ne bouge pas  durant  la coupe  - le cylindre de polystyrène  tranché  en son  milieu  et contient l’  échantillon parfaitement  immobile   - le cylindre  du polystyrène ayant été modelé un peu au-dessus de  diamètre  du cylindre  - il y est introduit  avec  certaine force  donc parfaitement calé

     2  types 

 --1 maintenu dans  une  main – Ranvier le plus ancien  qui a  l’avantage du controle à la fois  du Ranvier  et de la lame manié  par l’ autre main .

-- 2 fixé à  une table , cette fixation permet de faire glisser la lame parfaitement  horizontale  sur  le  plan du support  en utilisant les  deux  mains

 Car le point  important  est la position de la lame    

 2 types

      a --  L’utilisation  d’un couteau de type  barbier   pose  deux  difficultés

 **  aiguiser    :le problème est   que l’ obtention d’un fil  très fin  nécessite un excellent entrainement  ( connaissance  que nos  anciens avaient   et qui ne s’ invente pas)   -      .

** bien  utiliser   :le passage de cette lame  strictement parallèle  au plan  du support  est des plus  aléatoire  -  même  si on a l’ impression  de  bien  faire  le  geste.

    b--  L’ utilisation  simplement  d’un  lame  plate  et très rigide  ( comme les lames  Feather ) qu’ il  est très facile de faire  glisser  sur la surface du support ; de ce  fait  il est facile  d’ obtenir un parallélisme parfait  ( en exerçant une certaine  pression  pour  que cette lame garde  un  contact absolu avec le support  )

   L’ idéal  est l’  utilisation  d’une lame  de microtome  ( ces lames ont  toutes les qualités    -  leur  problème  est qu’ elles  sont vendues  entre 80 et  150  euros les  50 lames

 

 B    Microtome à mâchoires

 Avantage apparent  - on peut fixer facilement l’  échantillon   (directement  ou inclus dans la paraffine    )   -inconvénient   il y a   toujours    un  micromouvement de flexion lors du passage de la lame  ce qui fait une  coupe  inhomogène  en épaisseur

. A moins  d’utiliser une  lame de microtome fixée à un  support qui  va glisser  sur la surface du microtome. (image dans l’article  de MikrOscOpia )

https://forum.mikros...crotome-à-main/

 

En conclusion  quel que soit le  choix réalisé   il faut  s’  entraîner longtemps avant d’avoir la parfaite maîtrise de l’appareil.

 

             Dominique

 

 

 


Modifié par Dominique., 05 décembre 2022 - 06:27 .

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