Dominique.

Le début de l’histoire remonte à il y a 4 mois . Dans le bois prés de la maison , je recherchais des pieds de jeune chêne pour l' étude des exo mycorhizes. Il y avait là un vieux sapin abattu par la tempête de 1999 - Le processus de décomposition est actuellement assez avancé . Sur le tronc existait à ce moment là une tache jaune luminescente de type champignon gélatineux - Déjà bien occupé la décision fut prise d 'y revenir un peu plus tard . 1 mois a passé mais sur le tronc plus aucune trace de mon sujet. A la place existe cependant un ensemble de petites flaques visqueuses localisées dans les interstices du bois mort . La photo montre de petites taches blanches surnageant la flaque. En 1 de petites colonies de nature non définie (zone de prélèvement). En 2 colonies nettement fungiques. Examen microscopique : du prélèvement de la zone 1 . L’image met en évidence la présence de levures : Elles sont du genre Saccharomyces . Mais pourquoi des levures en cette partie du bois sachant que les levures se nourrissent surtout de glucose . Le bois étant de la cellulose il y avait forcement un agent de transformation présent dans l’environnement . Pour trouver la solution un prélèvement du milieu est réalisé et placer dans un boite de culture - milieu de Czapek : milieu artificiel facile à stériliser . En quelques jours ( 7 jours à 25°C en étuve ) la culture pousse . Dès le lendemain les hyphes ont colonisés le milieu . A 7 jours il est obtenu l’ image ci- dessus : la colonie s’est bien développée . Elle est de couleur vert tendre. Etude au microscope : Trichoderma ( 244 espéces) Hypothése ici esp Harzanium ( il y a un doute car la forme du chlamydospore ne correspond pas ) Regne Fungi Division Ascomycota Sous division Pezizomycotina Classe Sordariomycetes Sous classe Hypocreomycetidae Ordre Hypocreales Famille Hypocreaceae Genre Trichoderma ****************** Cette observation n’ a rien de bien originale si ce n’est la redécouverte du processus de la fabrication de l’ éthanol à partir du bois en milieu naturel . Processus de la fabrication d’éthanol : Les 3 constituants de la ligno cellulose ( polymére du glucose ) sont la cellulose – l’ hémicellulose et la lignine ). Seule la cellulose est aujourd’hui facilement transformable en glucose . Pour ce faire on utilise industriellement un champignon : -Trichoderma resei qui possède les enzymes nécessaires en bonne quantité : les cellulases . Le glucose est ensuite transformé en éthanol par fermentation sous l’ action de levures de la famille des Saccharomyces . L’éthanol est purifié par distillation . La difficulté de ce procédé vient de son faible rendement et de son coût élevé . Ce qui explique les recherches actuelles orientées vers la production d’enzymes plus efficaces . Pour revenir au début de cette observation Trichoderma à une autre forme : Comme beaucoup de champignons trichoderma a 2 phénotypes pour un génotype . Trichoderma est le stade anamorphe ,c’est à dire à reproduction asexuée . Le stade téléomorphe est un champigon appelé Hypocrea ; ce champignon a des couleurs jaune ou orange . Peut être qu' un jour la forme teleomophe réapparaîtra sur le vielle arbre - Je surveille pour pouvoir compléter cette présentation avec sa photo. Pour en savoir plus http://www.fungalbiodiversitycentre.com/publications/1048/part1.pdf Excellente étude de sur Hypocrea ( en anglais ) Dominique

Bonsoir à tous et à toutes Expérience amusante 1 Solution de chlorure de sodium à 9 pour mille - (dit sérum physiologique )– correspondant à la concentration du sodium dans le système circulant . Etalement , comme un frottis ,de 1 goutte - laissez sécher . Résultats : une grande quantité de cristaux de sel isolés mais apparition de quelques structures à division dichotomique . 2 Réalisation d’une prise de sang - centrifugation du prélèvement pour isoler le plasma. Etalement de 1 goutte du plasma – laissez sécher . La fibrine se dépose en structures plus complexes. 3 Mélange de 1 goutte de plasma et de 1 gtt de la solution de Nacl Etalement - laissez sécher. Une belle cristallisation complexe . Ce qui confirme ce qui vient d' être dit . dominique

Bonsoir Mpx et Sébastien Tu as raison Sébastien - j’avais oublié que la salive de la femme peut aussi cristalliser . Il serait intéressant d’avoir une photo . Protocole Femme ayant des cycles réguliers Ne prenant pas la pilule (mais pouvant avoir un stérilet) Faire un prélèvement de salive entre le 12 et 15 éme jour du cycle sur un cycle de 28 jours idéalement le 14 éme jour sinon 14 jours avant la date des règles prévues . – Si une membre ou l’ épouse d’un membre du forum répond au critère sa participation est ardemment souhaitée . Mpx je suis bien ennuyé car ma connaissance sur le sujet est très parcellaire La structuration des constituants et leur auto assemblage résultent des effets de polarité s'exerçant au niveau des molécules constitutives ; Ce que l’on voit ici est le résultat de cet assemblage mais ce nouvel assemblage peut il être appelé un cristal ? Amicalement hh

Contexte – En réalisant un frottis de dépistage du cancer du col de l’ utérus ,lors de ma pratique quotidienne , je trouve un col avec une glaire superbe - translucide et volumineuse . Je ne résiste pas et je fais un prélèvement supplémentaire que j’étale sur une lame . Avant de lire cette petite présentation -un petit rappel d’anatomie féminine : La glaire qui obture le col de l’ utérus va subir des modifications dans sa structure durant le cycle , autour de l’ ovulation qui est le 14 éme jour pour un cycle de 28 jours (-le 1 est le premier jour des règles ) la glaire devient très fluide - très filante le prélèvement a lieu durant cette période de quelques jours -En effet avant elle n’est pas assez volumineuse , après elle devient épaisse et compacte . On va utiliser le mot cristallisation - pourtant celui ci ne semble pas judicieux - les cristaux polarisent la lumière ici le phénomène n’est pas retrouvé - ce terme sera cependant garder lors de l’ exposition du sujet . Avant propos technique : 1 aucun colorant ne peut être utilisé ( à ma connaissance ) les structure sont détruites par tous les produits qui les touchent autre que l’ air. 2 les photos sont prises sans lamelles couvre objet . Le contraste de phase magnifie les images et curieusement le polariseur améliore aussi.. La cristallisation de la glaire va former des structures géométriques complexes : 2 types de structures sont d’emblée visibles La cristallisation fine -(F) La cristallisation large ( L ) (la classique forme en feuille de fougère Ces deux types de cristallisation se réalisent en s’ enchevêtrant séquence F L F en partant d ‘ un bord de la préparation ou séquence LFL (raisons de ces modification ? ) . Les zones de transition, au sein de l’étalement sont bien visibles : Les constructions sont infinies donnant des images étonnantes ; pourtant le motif géométrique de base est d’une grande simplicité (on y reviendra). Une étude de cette structure à un grossissement de 800 Cristallisation fine: Contraste de phase Contraste de phase + Lumière partiellement polarisée Cristallisation large: Le résultat de la déshydratation de ce mélange complexe va être à l’origine des structures présentées ici Ref http://www.poly-prepas.com/images/files/La%20f%C3%A9condation%20(L1%20SANTE).pdf A suivre car il existe un second liquide biologique qui cristallise presque de la même manière - le Liquide amniotique . - Il existe un troisième fluide mais chez le garçon : c’est le liquide prostatique dont le rôle est de permettre aux spermatozoïdes de bouger .Ce liquide va apparaît rapidement après une érection lors de l’ état d’ excitation et avant l’ éjaculation ;..mais là je suis trop vieux pour faire l’ expérience car ce phénomène disparaît avec l’ âge .La question reste cependant scientifiquement intéressante .je n’ai rien trouvé en langue française sinon voici le résumé du étude du phénomène . http://geoscience.net/research/024/421/crystallization-prostatic-fluid.php - A bientôt Dominique

Bonsoir Sébastien Merci de ton aide Donc deux tentatives de mise en évidence des stries de croissance montrent qu' elles ne semblent pas exister sur les céréales - cela risque donc d’ être vrai. NB Tes photos ont toujours une température de lumière très chaude -- elle tire vers le rouge -- (as tu un filtre au cobalt ? ) Ce qui explique que tu obtiennes un violet à la place d’un bleu . Les miennes par contre sont plutôt froides et tirent vers le bleu j’ai l’impression que je lis mieux une image un peu froide mais ce sont mes yeux ( ou plus exactement mon cerveau ) . A plus tard

Les moisissures ont une synthèse enzymatique importante et diversifiée . La colle va ainsi se trouver attaquée mais les réactions chimiques ne sont pas sans danger pour la fibre qui va elle aussi être attaquée par les cellulases et hemi-cellulases. L’humidité stimule la croissance fongique et les réactions enzymatiques L’ année dernière très pluvieuse a abouti à la perte d une grande partie du lin de la région ( ce qui rend cette culture assez aléatoire ) Cette année par contre les conditions sont bonnes - alternance de sécheresse et de pluie d’ orage - ( une trop grande sécheresse bloque tout rouissage - rendant le bois très difficile à enlever ) Il est possible cette année de décoller la totalité de la couche fibreuse avec une grande facilité . Le rouissage est terminé - les tissus se séparent correctement . Le lin part vers l’ usine de teillage - ou le bois sera enlevé ( broyé ) et la fibre traité avant d’ être filée et tissée . Ref http://asso-lin-demain.e-monsite.com/pages/mes-pages/traitement-des-fibres-1.html Dominique

Le rouissage Le 14 août 2013 la couleur du lin devient très sombre - Les conditions climatiques ( chaud et sec )vont permettre la récolte qui a commencé dans la région depuis quelques jours. Cette période est la plus angoissante pour le cultivateur . La difficulté du rouissage sur champ (il existe un rouissage en bassin) est qu il a constamment un risque de déséquilibre . La fibre de lin est désormais sèche - 3 tissus sont discernables : 1 la cuticule 2 la couche de fibres 3 la zone de « bois » qui est la zone vasculaire devenues - très dure et cassante . Cet ensemble est collé par la lignine : Le rouissage est l’opération qui conduit au décollage de ces trois tissus. 1 La cuticule se décolle la premiére : La cuticule sous l’effet du séchage se rétracte et se décolle spontanément .(photo en 1) Sous-jacent se trouve la zone de fibres qui exposée par l’ absence de cuticule va subir deux attaques- celle bien visible des moisissures et celle discrète des bactéries . En 3 se situe sous la couche de fibres, la couche de bois encore adhérente aux fibres . Les bactéries : On réalise un frottis à partir des fibres ( fibres mouillée à l eau stérile frottées contre la lame porte objet )- Après fixation à l’alcool -il est pratiqué une coloration de Gram . La flore bactérienne est polymorphe avec une dominance gram négatif ( en rose ) quelques coccis gram positif (en bleu sombre ) . Les champignons : Coloration au bleu coton X 200 La surface couverte par les moisissure est très importante . Les espèces sont nombreuses. La mise en culture sur milieu de Czapek de 5 petits morceaux de tige permet de mettre en évidence au moins six espèces -.

Sebatien tes photos sont superbes l' amyloplaste est bien coloré et sa structure est bien visible donc scientifiquement tu maîtrises .. Pour l ' arriére fond reste à faire disparaître les contours des bulles - n' eponges tu pas trop autour de la préparation aprés avoir mis le couvre-objet ce qui conduit à ne pas avoir assez de liquide autour de la préparation ? . A plus tard

Bonjour Sebastien Achat du lugol chez le pharmacien Préparation de la dilution dans un verre de montre La dilution qui ne colore pas trop vite les amyloplastes est de 40 gtt d’eau pour 1 gtt de lugol - mais ce résultat a été obtenu par tâtonnements -( faire plusieurs expériences ) Donc - préparation du prélèvement sur le porte-objet Placer 2 gouttes de la dilution du verre de montre Couvre objet sans attendre Examen sous le microscope ( en fait la coloration se fait assez rapidement ) Donc la maîtrise est obtenue quand on arrive à jongler avec le degré de la dilution entre 20 et 50 gtt et le temps passé à trouver une belle image . Mais je reste étonné par la coloration rouge donnée par ton lugol Quelqu’ un a t il une explication ? s l

Bonsoir Sébastien L ‘ effet rendu est différent mais les informations sont toutes présentes : Le hile / les stries de croissance /la charge cellulaire en amyloplaste. En plus il y a un léger effet de relief qui n’est pas désagréable . Mais quel colorant as-tu utilisé ? dominique

Bonjour Sébastien La question que je n ai pas réussi à régler est : existe- t- il des stries de croissance sur les amyloplastes des céréales .? Par ailleurs techniquement la difficulté vient de ce que les lentilles de la lumière polarisée mangent beaucoup de photons : -la solution est de faire des expositions très longues ( 2 à 3 secondes ) A plus tard Dominique

Bonjour Jean-Luc et Jean Marie Le microscope est un Leica DM 2500 et les prises de vues sont faites avec un Nikon D90- piloté par l’ordinateur utilisant le logiciel Breeze Systems . L’ amidon fait de la banane un excellent fruit mais aussi un parfait légume que l’on cuit comme les pommes de terre : cuisine africaine ( dans ce cas on utilise la banane Plantain ). Amicalement

Amyloplaste – (amidon et gélification) L’ amyloplaste est un des organites de la cellule végétale qui fait partie de la famille des plastes - C’est une des structures de stockage . C’est un leucoplaste (non coloré en opposition avec les chloroplastes et chromoplastes qui eux le sont) . Cette structure est l 'unité microscopique qui unifie une grande partie des productions agricoles - puisque le but final de la culture, des céréales, des tubercules de certains fruits , de certains rhizomes , - est l’obtention de l’ amyloplaste -une des sources de survie de l humanité . La raison de ce gigantesque intérêt pour l’ amyloplaste est sa capacité de stockage de l’ amidon -( Cette amidon est aussi trouvée en moindre quantité dans les chloroplastes -Il faut noter qu'amyloplastes et choroplastes sont interchangeables en fonction des circonstances en particularité de l' ensoleillement . ) . L'amidon est le mélange de deux molécules l ‘ Amylose et l’ Amylopectine qui sont des Polymères de glucose - ( il existe l’ équivalent dans le règne animal – la molécule est le glycogène ). La présentation de ce jour cherche à savoir comment se présentent les aminoplastes suivant les catégories végétales . Protocole Coloration avec du Lugol très dilué - 1 gtt de lugol pour 40 gtt d ‘eau Le Lugol colore en bleu l’ amylose et en violet ‘l amylopectine. Les tubercules -Pomme de terre – Topinambour La pomme de terre La plus connue des images est celle de l’ amyloplaste de la pomme de terre -sur le site de MikrOscOpia il y a d’ ailleurs de merveilleuse images : Ici http://forum.MikrOscOpia.com/topic/6803-amidon-pomme-de-terre/?hl=%2Bamidon+%2Bpomme+%2Bde+%2Bterre Les amyloplastes séchés et présentées en poudre forment la fécule de pomme de terre . La cellule de pomme de terre est caractérisée pas la présence d’un très grand nombre d’ amyloplastes . La taille est située entre 40µm et 60µm . ‘ Structure de l’ amyloplaste La cellule de pomme de terre est caractérisée pas la présence d’un très grand nombre d’ amyloplastes . La taille est située entre 40µm et 60µm . A Le hile . B Les stries d accroissement . Le hile est le point de départ de l’ accumulation des molécules d ‘ amylose et d’ amylopectine .La production est stockée ensuite par strates ( les stries de croissance) ; la production n’ est donc pas homogène et se fait pas cycles - Dans le cas de la pomme de terre il n ‘y a qu'un hile . . (Le grain d’amidon est le nom donné à un aminoplaste achevé). -- Le phénomène de la croix noire : Les deux lentilles du polariseur ,en fonction de leur ’ orientation de l’ une par rapport l’ autre , vont laisser passer la lumière ou l'arrêter . Si leur position ne laisse pas passer la lumière l'amyloplate va se comporter comme un polariseur et la lumière va à nouveau pouvoir passer .Ce qui veut dire que le grain d’ amidon va à son tour modifier le plan de polarisation -Il va donc se comporter comme un cristal . A certains endroits le phénomène n' existe pas d où la persistance de lignes sombres qui ici prennent l’ aspect d’une croix . Le topinambour/ Cette autre plante pousse au fond du jardin depuis des années sans que personne ne s 'en 'occupe sauf pour prélever quelques tubercules en automne ; Constatation : les amyloplastes sont quasi absents . La substance de réserve n'est donc pas l'amidon comme pour la pomme de terre bien que de manières éparses se trouve des grains d‘ amidon .( Photo ) Information prise cette plante fait ses réserves de glucide avec un autre polymère l'inuline , un polymère du fructose ( non digestible - il arrive donc dans le gros intestins non absorbé et sert de nourriture aux bactéries qui y résident en produisant beaucoup de gaz ) .Il s' agit donc d'un aliment de « ballaste » qui favorise le transit intestinal mais n 'apporte pas de calories . Les fruits : Le plus connu pour contenir de l’ amidon est la banane –les amyloplastes sont longs et ne possèdent qu' un hile ; la taille dépasse les 60 µm - Il sont nombreux par cellule ( 12 et plus ) . Les stries de croissance sont bien présentes et plus régulières que chez la pomme de terre . Les légumes (dit farineux) : Trois légumes seront présentés parmi la très longue liste : le haricot , la lentille et le pois. Ce qui ressort de l’observation Les hiles ne sont pas uniques et ponctuels mais forment des bandes ; on ne retrouve pas une croix mais des stries divergentes.en rayons de roue . Les tailles des amylopastes sont assez semblables autour de 30 µm . Les rhizomes Les rhizomes sont le lieu d’un intense mise en réserve énergétique . - Prenons un rhizome de l’Iris sur une plate-bande .du jardin. La charge en amidon des rhizomes d ‘iris apparaît aussi importante que celle de la pomme de terre - Je ne sais pas si l'iris est mangeable mais en cas de famine voilà une source de glucides mal connue - Le hile est centré , la croix des amyloplastes est retrouvée , la taille des amyloplates est faible autour de 16 µm . Les céréales 5 céréales seront présentées le blé , l'orge, l’avoine , le maïs et le riz . Les amyloplastes constituent la structure les plus importantes rencontrées dans la farine . Le Blé a un amyloplaste assez gros à 22 µm .Il a un hile centré et une croix bien distincte . Par contre même à un fort grossissement il n’est pas mis en évidence de stries de croissance. Ces stries ne seront trouvées sur aucune céréale -ce qui conduit à penser que la synthèse de l’ amylose et l’ amylopectine se déroule de manière homogène et continue contrairement à ce qui se passe chez les tubercules . ( A moins d’ avoir raté mon observation Un autre avis serait bien utile ici ) . Les amyloplastes sont à 26 µm pour l'orge et à 13 µm pour le maïs. Le phénomène de la croix est bien présent . La croix comme pour le blé est centrée . Les amyloplastes sont très petits autour de 13 µm pour l’avoine et 10 µm pour le riz qui est donc l' amyloplaste le plus petit de cette série .( Nb : je n'ai pas pu faire de photos à X400 par manque de lumière en lumière polarisée ). Amidon et gélification - Où comment se fait une bouillie? Protocole Amidon de pomme de terre colorée au Lugol dilué sur une lame porte objet . Le montage se fait à l’eau - mise d un couvre objet . La lame est placée dans une boîte déposée dans un bain marie à 60 ° . Durée de réaction 5 minutes . Résultats La réaction de gélification va détruire la structure cristalline réalisée par les molécules d’ amylose et d’amylopectine ( passage de 1 vers 2 )-. Les molécules sont désormais en solution aqueuse . La particularité de polariser la lumière , de ce fait , va disparaître progressivement (3 ) . Autre image de la même préparation : Cette photo montre la fin du processus de gélification ( 1 et 2 ) avec curieusement un amyloplaste qui résiste et ne suit pas le processus général .(3) . Selon l'article de Wikipédia les plastes , donc l’ l'amyloplaste ,auraient leur propre génome .Celui-ci serait le génome de cyanobacteries qui ont réussi à établir une relation symbiotique avec une cellule eucaryote . Dominique

Bonsoir et merci pour le renseignement Protocole utilise Tige de chanvre Fixation dans le GAL 20 pendant 7 heures . Mise dans une éprouvette bouchée remplie d’eau du robinet maintenue dans un bain marie à 58 ° pendant 16 heures . Les tiges sont nettement plus souples et se laissent couper tout en restant assez fermes. Section à la main levée avec une lame de bistouri N° 11 (qui est très rigide) sous loupe binoculaire Section facile sans à coup. Résultat : Coloration vert Etzold: X100 x200 L’ année est très avancée les chanvres vont bientôt atteindre 1,5 m de hauteur ; la coupe étant possible la présentation se fera l 'année prochaine , comme pour le lin cette année ,donc de mai à octobre . Bien amicalement .

La coupe d’une tige de chanvre est très difficile - en raison de la dureté de la tige -de type bois Dans le Langeron la formule de ramollissement est l'utilisation d’une solution d’acétate de cellulose introuvable . Quelqu ‘ un a t il une formule de ramollissement efficace pour les tiges dures ? Merci d' avance

Merci Sebastien

Le 26 juin le lin est en fleur Le 16 juillet la croissance est terminée Le lin atteint sa taille idéale - ( pour le cultivateur ) soit entre 80 cm et 1 mètre - On parle de croissance apicale - la fibre atteint sa longueur finale Les fleurs ont été fécondées laissant le fruit se développer – La tige est devenue très rigide et dure tout en restant non cassante l"arrachage a eu lieu le 15 juillet Ici le fruit est celui d’un lin « Textile « ( cette graine est plus petite que sur le Lin « Huile « Les espèces qui donnent de l’ huile ont des têtes plus lourdes et plus grosses ( de ce fait pour éviter que les fibres ne versent le cultivateur va mettre un racourcisseur : - la tige sera moins longue et donc impropre au textile ( la fibre servira pour le papier ) Microscopique ment La fibre s’ est transformée Elle a atteint sa forme définitive --Son diamètre varie entre 07 et 40 microns -Sa longueur est de 10 à 100mm - La paroi s’est beaucoup épaissie et la lumière centrale a presque disparu – On parle de croissance secondaire - la fibre voit sa paroi devenir très épaisse et la lumière centrale – le lumen se restreindre X 200 Les fibres se sont regroupées en faisceaux On peut compter une quarantaine de ces faisceaux autour d une section complète de la tige du lin Lumière polarisée X200 La section en longueur et l’examen en lumière polarisée montrent un certain nombre de détails Sur ces deux grossissements à 400 - en lumière polarisée on constate En A des zones de rupture qui sont les liaisons entre les cellules fibreuses -Ces cellules ont des longueurs variables sur une même plante - En B il existe sur la couche externe des fibres un enduit qui apparaît ici un peu comme un colle posée négligemment et dont le rôle est la cohésion des fibres réunies en faisceaux Cette image est l’aboutissement de notre présentation qui a commencé au printemps La fibre est terminée dans sa formation Chaque fibre est une seule cellule très allongée pour les plus longues de 6 à 10 centimètres, et d’un diamètre de 7 à 40 µm, composée de 70 à 80 % de cellulose. L’image nous montre une fibre qui se détache de son faisceau ( ce faisceau est appelé fibre technique par les filatures Il y a ici un piége sémantique le biologiste et l industriel ne parlent pas de la même chose ) En A ces zones sont appelées genoux – ce sont les zones de fragilité de la fibre - plus ces genoux sont nombreux moins la fibre est rigide et plus le tissus pourra se froisser En B le trou central de la fibre – le lumen - est toujours présent ; plus il est petit plus la fibre est résistante L ‘étude ultra structurale de la fibre est du domaine du microscope électronique http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/textiles/08-lin-fibre.html Pour compléter cette étude il faudrait faire des coupes étagées – en effet la taille des fibres n’est pas la même entre la zone prés du sol et le sommet de la plante puisqu’à la base les cellules fibreuses sont courtes, de grosse section, et souvent creuses, et au sommet, elles sont fines, longues et presque totalement pleines ; dans cette présentation des coupes ont été faites à la partie moyenne A suivre pour la dernière étape le Rouissage sur champs Pour en savoir plus http://www.saneco.com/IMG/pdf/lin.pdf http://www.usrtl-ifl.fr/spip.php?article30

Bonjour Sébastien Je te remercie de ton appréciation sur ce travail. Dans la présentation de ton labo tu nous parles d’un microtome - la chance d’avoir un tel appareil t’ouvre les portes d’une exploration intime de ton environnement – les messages que tu envoies régulièrement nous montre que tes champs d’intérêt sont nombreux Amicalement

Dans une précédente présentation Thibault ,nous a fait découvrir le processus de la mycorhization et a développé un exemple d’ endomychorize - celui de Globuse sur les racines de pois Cette observation pose la question de l’interaction entre les champignons et les plantes vasculaires . Cette interaction se développe dans les quelques centimètres d humus qui couvrent les bois et les forêts Au cours de l’ évolution cette proximité étroite a conduit à l’apparition de divers types de relations Il existe d’ abord une simple relation de proximité - les hyphes courent dans l’ humus sans intervenir avec l’ entourage - prélevant dans les amas de feuilles et de bois -mort les éléments carbonés dont a besoin le champignon . Une coupe de ces hyphes découvre un système qui rappelle les fils téléphoniques par la multitude des fibres incluses dans un même câble Il existe ensuite une relation plus étroite mais de simple voisinage où les hyphes vont utiliser les radicelles et les racines comme support au cours de leur pénétration commune de l’ humus . Il existe enfin deux systèmes d’interactions entre le fungus et les plantes de proximité - l’ ecto.mycorhize et l’ endo mycorhize Voyons surtout l’ectomycorhize Définition de l’ ectomycorhize selon l’article de Wikipedia « Les ectomycorhizes sont des associations fréquentes entre les arbres des régions tempérées (comme les Fagacées, les Pinacées ou les Bétulacées) et des champignons de la division des Ascomycètes, des Basidiomycètes ou des Zygomycètes. Le champignon s’associe d’abord aux racines fines à croissance déterminée, dépourvues de poils absorbants. Puis, il enveloppe la racine d’un manteau d’hyphes, le manchon mycorhizien. » On compte autour de 5 à 6000 espèces de champignons qui ont un comportement mycorhizien ( Russsules Bolets , Lactaires Chanterelles Truffes etc ) Pour illustrer cette affirmation je me suis rendu dans le bois du voisin - riche en chênes Les prélèvements se sont faits sur des petits chênes de 2 ans – Ils sont extrêmement n ombreux aux pieds des grands chênes et la grande majorité ne se développera pas sauf si l arbre porteur des glands disparaît. La photo permet de constater que les mycorhizes sont de très petites tailles et ne se développent que sur les radicelles ( traits rouges ) . 2 types d 'ectomycorhize ont été trouvés - dont je ne pourrai pas vous fournir les noms - Si vous venez à en chercher vous constaterez que la présence des champignons n’est pas vraiment massive et nécessite une grande vigilance . Première espèce trouvée – ( flèches rouges de la photo précédente ) Coupe transversale et longitudinale ( pour faire ces coupes il a été nécessaire de réaliser une double imprégnation -d’ abord dans l Agar de façon à pouvoir orienter ces échantillons minuscules (: -l’ agar refroidit lentement et reste transparent ) puis inclusion de l’ échantillon d’ Agar après déshydratation dans la paraffine ) . Coupe longitudinale de l’ ectomycorhize Coupe transversale de l’ ectomycorhize A Manchon des hyphes entourant la radicelle B Structure cellulaire de la radicelle C Réseau de Hartig lieu des échanges entre le chêne et le champignon Deuxième espèce sur un autre pied de petit chêne. Coupe après double imprégnation A Manchon des hyphes entourant la radicelle B Structure cellulaire de la radicelle C Réseau de Hartig lieu des echanges entre le chêne et le champignon Schéma résumant l’ ectomycorhisation Les mycorhizes arbusculaires sont le second mode d inter relation entre lechampigon et les plantes de proximité L’ expérience de Thibault a pour base le développement de pois dans un milieu artificiel fait de vermiculite mélangée à un milieu enrichi en spores mycorhiziennes . ( vendu dans le commerce ) En A racine de pois non contaminée avec la prolifération du chevelu des poils absorbants En B pénétration des poils absorbants par des hyphes - en vision épiscopique En C (ci- dessous) pénétration d un hyphe dans un poil absorbant L’hyphe va s’étendre dans les cellules corticales des racines Dans ce type de mycorhize le champignon ne cherche pas à envelopper les cellules de l’ hôte ( comme on la vu auparavant ) mais y pénètre sans trop perturber les structures Ce champignon va donc développer deux systèmes - extérieur où il envahit le sol adjacent dans toutes les directions Il réalise une énorme zone de contact avec le sol - intérieur avec un réseau d’ hyphes qui se termine dans les arbuscules qui sont les lieux d’ échange entre l ‘ hôte et le fungus Pour continuer cette partie du sujet je vous engage à reprendre l article de Thibault http://forum.MikrOscOpia.com/topic/12702-endomycorhizes/?do=findComment&comment=43397 Pour en savoir plus sur la mycorhization Les Mycorhizes la nouvelle révolution verte de Andé Fortin et coll ( édition multimondes )

Elle apparaît sous une forme tubulaire d’un diamètre évoluant autour de 30 / 40 µm .) - zone A - Les fibres apparaissent collées les unes aux autres . La présentation avec l' éclairage en fond noir constate que les fibres se comportent comme des fibres optiques : ] La fibre de lin s’ est différenciée au sein du parenchyme cortical pour prendre un structure tubulaire comme le confirme cette dernière photo Mais sa croissance n’est pas finie - A suivre ( pour la petite histoire dans le coin c'est aujourd'hui le 23 juin la fête du lin normand - le lin est fleuri en général mais le champs étudié ne l'est pas encore )

Le 16 juin La croissance du lin est rapide en 1 mois les tiges atteignent maintenant entre 40 et 60 cm La structure interne a déjà bien changé : La première constatation est la création d’un vide central ; le parenchyme médullaire s’ est dissocié et se réduit à des travées cellulaires délimitant des lacunes . Le parenchyme cortical devient le lieu de développement d’une structure, nouvelle où vont se développer les fibres (3) Coupe longitudinale 1 Cuticule ou épiderme . 2 Parenchyme cortical - ou écorce. 3 Faisceaux de fibres en constitution . Dès cette période la structure des fibres commence à se révéler :

Le lin --- 1- au printemps Le lin a eu du mal à pousser cette année dans la région - le froid et la température ont créé un retard de prés de 3 semaines Le 14 mai il est à 10 cm Les coupes sont faites au Ranvier et la coloration avec le vert d Etzold Coupe en A - le centre de la tige ( X 150) Coupe en B (X100 ) Coupe B grossissement 400 ( zone vasculaire ) Le but de cette observation va être de suivre sa croissance jusqu’ au rouissage pour répondre à la question qu’est ce qu ‘ une fibre de Lin au microscope ? A Suivre …..

Merci tous les 3 Le plus difficile a été de faire la coupe de l ‘épine car l ‘intérieur ne s’est pas remplie de paraffine malgré un bain dans la paraffine à 56 pendant 2 jours- ; de ce fait le microtome tendait à fracturer la structure . La deuxième difficulté a été de trouver les bons paramètres pour les durées d’ action des 3colorants ( hemalun – fuscine de ponceau –vert lumière ) du trichrome de masson - qui en fait se sont révélés différents du protocole surtout quant à leur durée d’ action . En fait le hérisson d’ Europe est en voie d’extinction - Si théoriquement il peu vivre 10 ans les comptages actuels ne trouvent plus guère que des sujets de 2 à 3ans . Amicalement -

A la partie inférieure du derme il existe un muscle qui se développe sur toute la surface de la zone dorsale du herisson : le pannicule carné Il est responsable de la couverture complète du hérisson quand celui-ci se met en boule . Il permet la remise en place de la peau quand il reprend une attitude de repos Ce muscle se renforce en périphérie formant un bourrelet . Comment se forme l’épine Je n’ ai pas trouvé de texte sur ce sujet - mais les images qui suivent permettent d’ évoquer l’ hypothèse suivante : La première image montre deux zones particulières : -Zone périphérique cornée - faite de keratinocytes aplatis et tassés de manière compacte -Zone centrale faite de Keratinocytes actifs - qui forment de longues colonnes cellulaires irradiant du centre vers la périphérie. Ces ketatinocytes actifs sont disposés en longs rubans formés de deux couches cellulaires - Les keratinocytes y prennent un aspect palissadique, disposés en ruban. Les rubans épousent la forme des futurs prolongements internes qu ils vont modeler en se transformant -, en s’ aplatissant comme il s ont l’ habitude la faire dans la peau pour la formations du stratum cornéum . La structure ainsi constituée ressemble aux voûtes des cathédrales gothiques ( revoir la photo A ) d’où l’ extrême résistance des épines du hérisson . Coloration – Hématoxyline / Fuscine de Ponceau Pour en savoir plus sur le hérisson La hulotte N° 77+++ http://animaux.org/herisson-europeen.htm http://www.dinosoria.com/herisson.htm ++ Dominique

L implantation des épines et leur mode de fixation dans la peau expliquent qu ‘ il est possible de soulever un hérisson en le tenant seulement par une seule épine -.Il est d’ ailleurs très difficile d’ arracher une épine de la peau d’ un hérisson , elle casse bien avant . L ‘image C montre que la partie intra épidermique est arrondie- Ce bulbe a deux avantages il assure un excellent ancrage et il permet aux épines de s’enfoncer dans le prédateur côté pointu sans léser la peau du hérisson côté arrondi . Coloration au trichrome de Masson En 1 il existe un muscle peaucier dont le rôle est d’ orienter l’ épine . Ce muscle se fixe d’ un seul coté Son but est de redresser l’ épine ou de l’ abaisser L’ ensemble des piquants est érigé pas contraction du pannicule carné ( voir plus loin ) mais individuellement chaque épine a son système de contrôle. En - 2 - le tissu graisseux s’ accumule sous la zone hypodermique -; Cette graisse joue le rôle d’ isolant et de réserve pour la période d’ hibernation qui s ‘étend de septembre à fin février. Cette photo passe presque exactement au centre du bulbe et révèle que l’épine est ouverte par le dessous Cet orifice permet le passage du système vasculaire qui va alimenter la structure cellulaire interne que nous allons rencontrer dans quelques instants . Sur la droite une épine a été coupée peu après le début de sa formation - en effet les épines ne sont pas systématiquement perpendiculaires au plan cutané et peuvent démarrer inclinées dans le tissu hypodermique . Cette image met en évidence la présence de bourgeons dormants - qui en se développant plus tard vont permettre le remplacement des vieilles épines après leur chute .